Anticuerpo Policlonal Anti-WNK1 para WB, IF/ICC, ELISA - Q9H4A3

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de WNK1

• WNK1 es una serina/treonina proteína quinasa que constituye un componente crítico de la cascada de quinasas WNK1-SPAK/OSR1, que regula la presión arterial y la homeostasis de iones. Bajo estrés hiperosmótico, actúa como sensor de agregación molecular, experimentando separación de fases líquido-líquido para crear un compartimento sin membrana que concentra a WNK1 junto con sus sustratos OXSR1/OSR1 y STK39/SPAK, promoviendo su fosforilación y activación. Referencias relacionadas: PMID:15883153, PMID:17190791, PMID:31656913, PMID:36318922
• OXSR1/OSR1 y STK39/SPAK activados fosforilan y activan los cotransportadores Na-K-Cl (SLC12A1/NKCC2, SLC12A2/NKCC1) al mismo tiempo que inhiben los cotransportadores K-Cl (SLC12A5/KCC2, SLC12A6/KCC3), promoviendo así el influjo de iones y el aumento del volumen regulatorio. Referencias relacionadas: PMID:16263722, PMID:21321328, PMID:19665974
• Más allá del transporte de iones, WNK1 regula la angiogénesis en células endoteliales a través de la activación de la vía SPAK/OSR1, contribuyendo a la quimiotaxis y la proliferación. Referencias relacionadas: PMID:25362046
• WNK1 fosforila sustratos como PCF11 (que regula la exportación nuclear de ARNm) y NEDD4L, y actúa como regulador negativo de la autofagia. También tiene funciones de andamiaje independientes de su actividad quinasa, como la estabilización del complejo proteico de la membrana del retículo endoplásmico y la regulación de ENaC mediante la activación de SGK1. Referencias relacionadas: PMID:29196535, PMID:27911840, PMID:33964204, PMID:36373794
• WNK1 es necesaria para la abscisión mitótica y puede participar en la reorganización del citoesqueleto de actina. Referencias relacionadas: PMID:21220314, PMID:10660600
• Se expresa de forma generalizada con niveles más altos en testículo, corazón, riñón y músculo esquelético; una isoforma renal específica sin actividad quinasa actúa como regulador dominante negativo de la quinasa de longitud completa. Subcelularmente, WNK1 se localiza en el citoplasma, el núcleo y el huso mitótico.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno comprende los aminoácidos 1-210 del extremo N-terminal de WNK1 humana; esta región no se superpone con el dominio quinasa (residuos 221–491), lo que permite detectar tanto la isoforma de longitud completa como las posibles isoformas sin actividad quinasa.
• Para Western blot, tenga en cuenta el alto peso molecular predicho (~251 kDa); utilice un gel de SDS-PAGE de bajo porcentaje (por ejemplo, 6%) y transferencia húmeda con tiempo prolongado para garantizar una transferencia eficiente.
• En inmunofluorescencia/inmunocitoquímica, WNK1 se localiza en el citoplasma, el núcleo y el huso mitótico; se debe validar la fijación y permeabilización adecuadas para el tipo celular y el compartimento de interés específico.
• Como anticuerpo policlonal, puede producirse variabilidad entre lotes; incluya controles positivos (por ejemplo, HeLa, HEK293) y negativos en cada experimento para confirmar la reactividad.
• Para ELISA, considere un formato sándwich con un anticuerpo de captura validado si se necesita detección cuantitativa.

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