Anticuerpo Monoclonal de Conejo Anti-WT1 para WB, IHC-P, ELISA - P19544

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de WT1

• WT1 (proteína 1 del tumor de Wilms, también conocida como WT33) es un factor de transcripción con múltiples isoformas generadas por empalme alternativo, incluidas las variantes con inserción KTS. La proteína contiene cuatro dominios de dedos de zinc en el extremo C-terminal que median la unión al ADN.
• Reconoce la secuencia consenso de ADN 5'-GCG(T/G)GGGCG-3' y regula genes diana como EPO, desempeñando un papel fundamental en el desarrollo del sistema urogenital. Referencias relacionadas: PMID:7862533 PMID:17716689 PMID:25258363
• WT1 exhibe roles duales dependientes del contexto como supresor tumoral y oncogén en varios cánceres, con funciones específicas de isoforma.
• Las isoformas que carecen del motivo KTS funcionan principalmente como factores de transcripción, mientras que las isoformas que contienen KTS pueden interactuar con ARNm y participar en el metabolismo o empalme del ARNm. Referencias relacionadas: PMID:15520190 PMID:16934801 PMID:19123921
• La localización subcelular incluye núcleo, nucléolo, nucleoplasma, motas nucleares y citoplasma, lo que refleja sus diversas funciones.
• Se expresa predominantemente en el riñón y en un subconjunto de células hematopoyéticas, lo que es consistente con su participación en el desarrollo y las malignidades renales y hematológicas.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen ubiquitinación (conjugación Ubl) y coordinación de iones metálicos por los dominios de dedos de zinc, que son esenciales para la unión al ADN y la actividad transcripcional.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 60–250 de WT1 humano, cubriendo el dominio regulador N-terminal aguas arriba de la región de los dedos de zinc. Este diseño puede favorecer el reconocimiento de isoformas o estados de activación específicos; valide el patrón de reactividad en su contexto experimental.
• El peso molecular predicho es de aproximadamente 49 kDa; confirme el tamaño de la banda por WB en lisados relevantes (por ejemplo, líneas celulares renales) y considere las posibles modificaciones postraduccionales que pueden causar desplazamientos.
• Para IHC-P, los protocolos de recuperación de antígeno (por ejemplo, recuperación de epítopo inducida por calor) deben optimizarse, y la expresión en tejidos renales, testiculares o tumorales puede servir como controles positivos.
• El anticuerpo presenta reactividad cruzada con WT1 de ratón y rata, lo que permite estudios traslacionales en modelos de roedores; sin embargo, se recomienda validación en cada especie.
• Para aplicaciones de ELISA, se recomienda emparejarlo con un anticuerpo de detección que se dirija a un epítopo no superpuesto para garantizar la especificidad del ensayo.

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