Anticuerpo Monoclonal Anti-XPD/ERCC2 para WB, IHC-P, ELISA - P18074

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de XPD/ERCC2

• La proteína XPD/ERCC2 es una helicasa de ADN dependiente de ATP 5'-3' que es un componente central del factor general de transcripción y reparación del ADN IIH (complejo TFIIH), desempeñando un papel crítico en la reparación por escisión de nucleótidos (NER) y la iniciación de la transcripción. Referencias relacionadas: PMID:31253769, PMID:8413672, PMID:9771713
• En la NER acoplada a la transcripción, XPD/ERCC2 reconoce bases de ADN dañadas y secuestra en la cromatina sobre el ADN dañado por UV; la actividad de helicasa dependiente de ATP es esencial para la apertura del ADN alrededor de la lesión. Referencias relacionadas: PMID:17466626, PMID:23352696, PMID:9771713
• Durante la iniciación de la transcripción por la ARN polimerasa II, XPD/ERCC2 actúa como un puente estructural entre el módulo de quinasa activadora de CDK (CAK) y el complejo central TFIIH, y su actividad de helicasa es necesaria para la apertura del promotor y la escape; se producen grandes cambios conformacionales entre los complejos de NER y transcripción. Referencias relacionadas: PMID:10024882, PMID:31253769, PMID:33902107, PMID:17466626
• Más allá de sus funciones en la reparación del ADN y la transcripción, XPD/ERCC2 participa en la segregación cromosómica como parte del complejo MMXD asociado al huso mitótico, y regula la actividad del receptor de vitamina D.
• La localización subcelular incluye el núcleo, el citoplasma y el citoesqueleto (huso), lo cual es consistente con sus funciones en la transcripción, la reparación del ADN y la mitosis.
• XPD/ERCC2 contiene un clúster de hierro-azufre 4Fe-4S y un dominio de unión a ATP; las mutaciones se asocian con xeroderma pigmentoso, síndrome de Cockayne y fenotipos de tricotiodistrofia.
• El empalme alternativo produce múltiples isoformas, y la proteína está sujeta a conjugación de ubiquitina.

Orientación Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a una secuencia dentro de los aminoácidos 600-700 de XPD/ERCC2 humano; considere que esta región puede conservarse entre especies, contribuyendo a la reactividad cruzada observada con ratón y rata.
• Para Western blot, se espera una banda a aproximadamente 87kDa; valide la banda específica comparando con marcadores de peso molecular conocidos y utilizando los controles apropiados.
• En inmunohistoquímica en secciones empotradas en parafina (IHC-P), pueden ser necesarios protocolos de recuperación de antígeno para una detección óptima; se recomienda realizar pruebas piloto con tejidos de control.
• Para ELISA, el anticuerpo puede usarse para capturar o detectar péptidos XPD/ERCC2 o proteína recombinante; se aconseja la optimización de la concentración de recubrimiento y el formato de detección.

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