Anticuerpo Monoclonal Anti-YTHDF2 (Validado por KO) para WB, IP, IF/ICC, ELISA - Q9Y5A9

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de YTHDF2

• YTHDF2 se une específicamente a ARN que contienen N6-metiladenosina (m6A) y regula su estabilidad al promover su degradación mediante interacciones con el complejo deadenilasa CCR4-NOT y el complejo ribonucleasa P/MRP. Referencias relacionadas: PMID:24284625 PMID:26046440 PMID:26318451 PMID:27558897
• Los parálogos YTHDF (YTHDF1, YTHDF2 y YTHDF3) comparten objetivos de ARNm que contienen m6A y actúan de forma redundante para mediar la degradación de ARNm y la diferenciación celular. Referencias relacionadas: PMID:28106072 PMID:32492408
• A nivel subcelular, YTHDF2 se localiza en el citosol, los cuerpos P y los gránulos de estrés, y puede translocarse al núcleo bajo determinadas condiciones.
• YTHDF2 promueve la formación de compartimentos sin membrana separados por fase, como los cuerpos P y los gránulos de estrés, al experimentar separación de fase líquido-líquido tras unirse a ARNm con múltiples residuos de m6A. Referencias relacionadas: PMID:31292544 PMID:31388144 PMID:31642031
• Es necesario para la especificación de células madre hematopoyéticas al promover la degradación de ARNm que contienen m6A. Referencias relacionadas: PMID:30065315
• YTHDF2 regula el desarrollo neural al inhibir la especificación neural mediante la degradación dependiente de m6A de ARNm específicos neuronales. Referencias relacionadas: PMID:32169943
• Regula la respuesta inmune innata al unirse a los transcriptos IFNB que contienen m6A y promover su degradación, inhibiendo así la producción de interferón de tipo I. Referencias relacionadas: PMID:30559377
• Durante la infección viral, YTHDF2 se une a ARN virales modificados con m6A para promover la expresión génica y la replicación viral, como se ha observado en SV40 y el herpesvirus asociado al sarcoma de Kaposi (KSHV). Referencias relacionadas: PMID:29447282 PMID:29659627

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno (aminoácidos 339–565) incluye el dominio YTH crítico para el reconocimiento de m6A; para Western blot, se recomienda usar líneas celulares knockout para confirmar la especificidad de la banda, ya que este anticuerpo ha sido validado por KO.
• Para inmunoprecipitación (IP), el anticuerpo puede ser adecuado para enriquecer complejos endógenos de YTHDF2-ARN; incluya controles negativos adecuados (por ejemplo, IgG) para evaluar el ruido de fondo.
• En inmunofluorescencia/ICC, YTHDF2 aparece típicamente en focos citoplasmáticos (cuerpos P y gránulos de estrés) y puede trasladarse al núcleo; optimice las condiciones de fijación/permeabilización para su tipo celular y tratamiento (por ejemplo, gránulos de estrés inducidos por arsenito).
• Para ELISA, se pueden emplear protocolos estándar de ELISA indirecto con YTHDF2 recombinante o lisados celulares; valide en la matriz de muestra correspondiente.

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