Anticuerpo policlonal de conejo anti-YTHDF2 para WB, IHC, IF - Q9Y5A9

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de YTHDF2

• YTHDF2 es una proteína lectora de N6-metiladenosina (m6A) que se une específicamente a ARN que contiene m6A y regula su estabilidad. Referencias relacionadas: PMID:24284625, PMID:26046440, PMID:26318451
• Promueve la degradación de los ARNm con m6A mediante la deadenilación CCR4-NOT o la escisión endorribonucleolítica por la ribonucleasa P/MRP, dependiendo del contexto molecular. Referencias relacionadas: PMID:27558897, PMID:30930054
• Los parálogos de YTHDF (YTHDF1, YTHDF2, YTHDF3) comparten ARNm diana y actúan de forma redundante en la degradación del ARNm y la diferenciación celular. Referencias relacionadas: PMID:28106072, PMID:32492408
• A nivel subcelular, YTHDF2 se localiza en el citosol, los cuerpos P, los gránulos de estrés y el núcleo, y experimenta una separación de fases líquido-líquido para formar compartimentos sin membrana. Referencias relacionadas: PMID:31292544, PMID:31388144, PMID:31642031
• Su expresión es elevada en células madre pluripotentes inducidas (iPSC) y disminuye durante la diferenciación neural; inhibe la especificación neural al promover la degradación de ARNm neuronales específicos metilados. Referencias relacionadas: PMID:32169943
• YTHDF2 también regula el metabolismo lipídico hepático circadiano, la inmunidad antiviral innata, la entrada en mitosis y la espermatogénesis mediante la degradación de ARNm dependiente de m6A. Referencias relacionadas: PMID:30428350, PMID:30559377, PMID:32267835
• Durante la infección viral, YTHDF2 puede promover la expresión génica y la replicación de SV40 y KSHV al unirse a ARN virales modificados con m6A. Referencias relacionadas: PMID:29447282, PMID:29659627

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a la región N-terminal (aa 1–200) de YTHDF2 humano; tenga en cuenta la ubicación de este epítopo al diseñar ensayos multiplex o utilizar estándares de proteínas truncadas.
• Para Western blot, el peso molecular previsto es de aproximadamente 62 kDa; incluya lisados de control positivo adecuados (p. ej., HeLa, HEK293T) y optimice la carga de proteína para lograr una detección clara.
• En inmunofluorescencia (IF/ICC, IF-P), fije y permeabilice las células de acuerdo con la localización citosólica y granular de la diana; valide los patrones de tinción en líneas celulares positivas y negativas conocidas.
• Para inmunohistoquímica en cortes de parafina (IHC-P), pruebe las condiciones de recuperación antigénica (p. ej., tampón de citrato pH 6,0 o EDTA pH 9,0) y ajuste la concentración del anticuerpo para reducir el fondo.
• El anticuerpo presenta reactividad cruzada con YTHDF2 de ratón y de rata, lo que permite realizar estudios traslacionales en modelos de roedores; confirme la homología de secuencia si la especificidad absoluta es crítica.
• Dado que YTHDF2 se une a ARN modificado con m6A, considere tratar las células con inhibidores de la metilación o RNasa al evaluar la especificidad de la señal en contextos dependientes del ARN.

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