Anticuerpo Policlonal Anti-ZAP70 para WB, IF/ICC, ELISA - P43403

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de ZAP70

• ZAP70 (Tirosina-proteína quinasa ZAP-70) es una proteína de 70 kDa asociada a la cadena zeta, también conocida como tirosina quinasa relacionada con Syk, codificada por el gen ZAP70 (SRK).
• Desempeña un papel esencial en la respuesta inmune adaptativa regulando la motilidad, adhesión, expresión de citoquinas y desarrollo de timocitos de las células T. Tras la activación del TCR, ZAP70 es reclutada hacia las cadenas CD3 fosforiladas a través de motivos ITAM en la membrana plasmática. Referencias relacionadas: PMID:7509083
• La localización subcelular es principalmente citoplasmática, con translocación a la membrana celular tras la activación del TCR.
• La expresión tisular está restringida a células T, células asesinas naturales (NK), timocitos tempranos y células pro/pre B.
• Contiene dominios SH2 en tándem en el extremo N-terminal y un dominio quinasa en el extremo C-terminal; sufre fosforilación en múltiples residuos de tirosina y acetilación.
• También es necesaria para la internalización y degradación del TCR mediante la interacción con ligasas E3 de ubiquitina, modulando así la desactivación de la activación de las células T.
• Contribuye al desarrollo y activación primaria de los linfocitos B a través de la señalización del receptor de células B.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno abarca los aminoácidos 1-300 de ZAP70 humano (región N-terminal), cubriendo los dominios SH2; la reactividad contra isoformas más cortas o variantes de empalme debe verificarse experimentalmente.
• Para Western blot, considere usar lisados celulares completos de Jurkat o PBMCs humanos; los lisados de esplenocitos de ratón o rata también pueden ser adecuados dada la reactividad cruzada reportada.
• En inmunofluorescencia/ICC, valide las condiciones de fijación y permeabilización en el sistema de muestra relevante, ya que la proteína puede ser citosólica o estar asociada a membrana.
• Las aplicaciones de ELISA pueden requerir optimización de las condiciones de recubrimiento y dilución del anticuerpo; la inclusión de un paso de bloqueo con proteína recombinante ZAP70 podría ayudar a evaluar la especificidad.

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