Anticuerpo monoclonal APC Anti-LGR5 para citometría de flujo - O75473

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de LGR5

• LGR5 (también conocido como GPR49, GPR67 o HG38) es un receptor acoplado a proteína G con repeticiones ricas en leucina que actúa como receptor de las R-spondinas (RSPO1–RSPO4).
• Tras unirse a las R-spondinas, LGR5 potencia la vía canónica de señalización Wnt al asociarse con LRP6 fosforilado y receptores frizzled, aumentando así la expresión de genes diana de Wnt.
• A diferencia de los receptores clásicos acoplados a proteína G, LGR5 no activa proteínas G heterotriméricas para transducir señales.
• LGR5 es un marcador de células madre bien establecido del epitelio intestinal y el folículo piloso, y cumple un papel fundamental en el desarrollo y mantenimiento de las células madre intestinales adultas durante el desarrollo postembrionario.
• El receptor se localiza principalmente en la membrana celular, y también se detecta en el aparato de Golgi y la membrana de la red trans-Golgi.
• Su expresión se encuentra en músculo esquelético, placenta, médula espinal y diversas regiones del cerebro; en el intestino, marca las células madre en la base de las criptas del epitelio mucoso colónico y del intestino delgado, y se ha informado de sobreexpresión en cánceres de ovario, colon e hígado.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen glicosilación enlazada a N y formación de enlaces disulfuro. La proteína existe en múltiples isoformas debido al empalme alternativo.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno abarca los aminoácidos 480–580 de LGR5 humano, una región intracelular. El conjugado APC permite la detección directa por citometría de flujo sin necesidad de un anticuerpo secundario.
• Para citometría de flujo, se recomienda probar protocolos de tinción de superficie en células vivas y tinción intracelular, ya que la accesibilidad al epítopo puede variar; la permeabilización puede ser necesaria si el epítopo reconocido por el anticuerpo no está expuesto en la superficie extracelular.
• LGR5 se expresa en poblaciones de células madre; se recomienda una disociación adecuada del tejido en suspensiones de células individuales y la selección de células viables mediante gating para identificar con precisión las células LGR5+.
• Valide el anticuerpo en el sistema experimental correspondiente (por ejemplo, organoides intestinales humanos, líneas celulares cancerosas o tejido primario) utilizando controles adecuados.

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