Anticuerpo monoclonal de conejo anti-CD117/c-Kit humano conjugado con APC para CF - P10721

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de CD117/c-Kit

• CD117/c-Kit, también conocido como receptor Kit del factor de crecimiento de mastocitos/células madre, es una tirosina cinasa receptora transmembrana codificada por el protooncogén KIT. Pertenece a la familia de tirosinas cinasas receptoras de tipo III y se caracteriza por dominios extracelulares similares a las inmunoglobulinas, una única hélice transmembrana y un dominio cinasa intracelular dividido.
• La función principal de CD117/c-Kit es actuar como receptor de superficie celular para el factor de células madre (SCF/KITLG). Tras la unión del ligando, KIT se dimeriza, lo que conduce a la autofosforilación y activación de múltiples cascadas de señalización posteriores, incluidas las vías PI3K/AKT, RAS/MAPK y JAK/STAT.
• A través de estas vías, CD117/c-Kit regula procesos celulares esenciales como la supervivencia, proliferación, diferenciación y migración celular. Desempeña funciones críticas en la hematopoyesis, el mantenimiento de las células madre, la gametogénesis, la melanogénesis y el desarrollo y funcionamiento de los mastocitos.
• CD117/c-Kit se localiza predominantemente en la membrana celular, pero tras su activación puede internalizarse y encontrarse transitoriamente en el citoplasma antes de su degradación o reciclaje.
• La proteína experimenta varias modificaciones postraduccionales, incluida la glucosilación ligada a N, la formación de enlaces disulfuro y la ubiquitinación. La fosforilación inducida por el ligando en múltiples residuos de tirosina crea sitios de anclaje para proteínas de señalización que contienen dominios SH2, propagando así la señal.
• En el testículo humano, CD117/c-Kit se expresa en las espermatogonias y las células intersticiales de Leydig, pero no en las células de Sertoli ni en los espermatocitos. Su expresión persiste en los espermatozoides eyaculados. Referencias relacionadas: PMID:20601678

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno utilizado para generar este anticuerpo comprende los aminoácidos 26-520 de CD117/c-Kit humano, que corresponden al dominio extracelular. Este diseño puede conferir especificidad por el receptor nativo en la superficie celular.
• Este anticuerpo está conjugado con APC (aloficocianina) para aplicaciones directas de citometría de flujo. Considere utilizar controles de compensación adecuados al realizar citometría de flujo multicolor y evite la exposición prolongada a la luz para preservar la estabilidad del fluoróforo.
• Para la citometría de flujo, valide el anticuerpo en líneas celulares humanas conocidas por expresar CD117 (p. ej., HEL, M-07e o células primarias de médula ósea). Incluya un control de isotipo adecuado para evaluar la unión inespecífica.
• La concentración óptima del anticuerpo debe determinarse mediante experimentos de titulación en el sistema experimental correspondiente. La fijación y permeabilización celular pueden afectar la unión de este anticuerpo; por lo tanto, evalúe la compatibilidad si también se tiñen dianas intracelulares.

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