Anticuerpo monoclonal de conejo anti-CD162/PSGL-1 humano conjugado con APC para citometría de flujo - Q14242

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización del ligando 1 de la glicoproteína P-selectina (CD162/PSGL-1)

• CD162/PSGL-1 es un proteoglucano de tipo SLe(x) que actúa como el ligando principal de las selectinas P, E y L, mediando el rápido rodamiento de los leucocitos sobre el endotelio vascular durante la inflamación.
• La proteína existe en múltiples isoformas debido al corte y empalme alternativo, lo que puede modular sus propiedades de unión o su expresión.
• Se expresa predominantemente en la superficie de neutrófilos, monocitos y la mayoría de los linfocitos, desempeñando un papel crítico en el tráfico de leucocitos.
• La localización subcelular se encuentra principalmente en la membrana plasmática (membrana; proteína de membrana de tipo I de un solo paso).
• PSGL-1 sufre numerosas modificaciones postraduccionales, incluidas la sulfatación, la sialilación y la O-glucosilación, esenciales para la unión a las selectinas; otras modificaciones incluyen la fosforilación, la formación de enlaces disulfuro y la formación de ácido piroglutámico N-terminal.
• Además de su función en la adhesión celular, PSGL-1 actúa como receptor del enterovirus 71, facilitando la entrada viral en las células hospedadoras.
• La proteína contiene un péptido señal, un dominio extracelular similar a la mucina con repeticiones decaméricas, una hélice transmembrana y una cola citoplasmática.

Orientación experimental y consejos técnicos

• Dado que el inmunógeno corresponde al dominio extracelular (aa 42-295), se espera que el anticuerpo resultante reconozca la forma transmembrana nativa de CD162/PSGL-1 en células vivas, por lo que resulta especialmente adecuado para la citometría de flujo (FC).
• Para aplicaciones de FC, optimice la titulación del anticuerpo y considere el uso de controles de isotipo adecuados para garantizar la especificidad, especialmente debido a la posibilidad de unión a receptores Fc en los leucocitos.
• Valide la expresión de CD162 en las poblaciones celulares objetivo (por ejemplo, leucocitos de sangre periférica, células T activadas o líneas celulares apropiadas) antes de su uso, ya que los niveles de expresión pueden variar según el estado de activación celular.
• Dado que PSGL-1 es una proteína altamente glucosilada, el epítopo reconocido puede depender de la conformación; las condiciones desnaturalizantes podrían afectar la unión del anticuerpo en aplicaciones alternativas, como el western blot.
• El conjugado con APC permite la detección directa mediante fluorescencia, eliminando la necesidad de reactivos secundarios; asegúrese de realizar una compensación adecuada en los paneles de citometría de flujo multicolor para evitar el solapamiento espectral.

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