Anticuerpo Monoclonal de Conejo anti-Humano CD172a/SIRPα conjugado con APC para Citometría de Flujo - P78324

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de SIRPα/CD172a

• La tirosina-proteína fosfatasa no receptora tipo sustrato 1 (SIRPα, también conocida como SHPS-1, CD172a, BIT, MYD-1, p84) es un receptor de superficie celular tipo inmunoglobulina que actúa como una proteína de anclaje para PTPN6 y PTPN11, induciendo su translocación desde el citosol a la membrana plasmática.
• Funciona como receptor para CD47, mediando la regulación negativa de la fagocitosis, la activación de mastocitos y la activación de células dendríticas, e inhibiendo la maduración y la producción de citoquinas por células dendríticas tras la unión a CD47.
• Apoya la adhesión de neuronas cerebelosas, la extensión de neuritas y la unión de células gliales, lo que sugiere funciones en la sinaptogénesis y la función sináptica.
• Actúa como receptor para la trombospondina-1 (THBS1), que estimula la fosforilación de SIRPA y desencadena la producción de ROS derivada de la NADPH oxidasa en células no fagocíticas. Referencias relacionadas: PMID:24511121
• Existe como tres isoformas principales (Sirp-alfa-1, -2, -3) debido al empalme alternativo, con expresión ubicua en tejidos pero niveles más altos en el cerebro y en células mieloides, y ausente en células T.
• Se localiza en la membrana celular como una proteína de membrana de paso único tipo I, con una región extracelular que contiene tres dominios tipo inmunoglobulina y una cola citoplasmática con sitios de fosforilación de tirosina.
• Está altamente glicosilada y fosforilada, desempeñando un papel en la inmunidad antiviral al limitar la internalización de arenavirus del nuevo mundo.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno cubre los aminoácidos 31–370, que comprenden todo el dominio extracelular; por lo tanto, se espera que el anticuerpo reconozca la conformación nativa de SIRPα en la superficie celular.
• Como anticuerpo monoclonal conjugado con APC, está listo para la tinción directa por inmunofluorescencia en citometría de flujo sin necesidad de un reactivo de detección secundario.
• Para una tinción óptima, valore el anticuerpo en el tipo celular objetivo (por ejemplo, monocitos humanos, macrófagos o líneas celulares dendríticas) para determinar la concentración de trabajo.
• Incluya un control de isotipo apropiado (IgG de conejo conjugada con APC, clon coincidente) y, si utiliza sangre total o suspensiones celulares derivadas de tejido, pre-incube con un reactivo bloqueador de receptores Fc para minimizar la unión inespecífica.
• Dado que SIRPα no se expresa en células T, estas pueden servir como control negativo interno; valide la especificidad bajo sus condiciones experimentales utilizando poblaciones celulares positivas y negativas conocidas.

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