Anticuerpo monoclonal APC de conejo anti-EGFR humano para citometría de flujo - P00533

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de EGFR

• El receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFR) es una receptora tirosina quinasa prototípica que, tras unirse a los ligandos de la familia EGF, sufre homodimerización o heterodimerización y autofosforilación, activando cascadas de señalización downstream clave que incluyen RAS-RAF-MEK-ERK, PI3K-AKT, PLCγ-PKC y STAT (PubMed:27153536, PubMed:2790960). Referencias relacionadas: PMID:27153536, PMID:2790960
• Los ligandos conocidos de EGFR incluyen EGF, TGF-α, amfregulina (AREG), epigen (EPGN), betaculina (BTC), epiregulina (EREG) y factor de crecimiento similar a EGF de unión a heparina (HBEGF), cada uno activando dinámicas de señalización distintas (PubMed:12297049, PubMed:15611079, PubMed:17909029). Referencias relacionadas: PMID:12297049, PMID:15611079, PMID:17909029
• El EGFR fosforilado recluta proteínas adaptadoras como GRB2, iniciando una señalización intracelular compleja que gobierna la proliferación celular, la supervivencia, la migración y la diferenciación (PubMed:10805725). Referencias relacionadas: PMID:10805725
• Más allá de las vías canónicas, EGFR fosforila directamente sustratos como RGS16 (acoplado a la señalización de proteínas G) (PubMed:11602604) y MUC1 (que promueve las interacciones SRC/β-catenina) (PubMed:11483589). Referencias relacionadas: PMID:11602604, PMID:11483589
• EGFR modula la motilidad celular a través de la interacción con CCDC88A/GIV, que retiene el receptor en la membrana plasmática para mantener la señalización promigradora (PubMed:20462955). Referencias relacionadas: PMID:20462955
• También puede activar la cascada de NF-κB (PubMed:11116146) y contribuye a procesos neurológicos como el aprendizaje, la memoria y la hipersensibilidad al dolor (por similitud). Referencias relacionadas: PMID:11116146
• La isoforma 2 actúa como un antagonista potencial de la acción del EGF y se expresa notablemente en cánceres de ovario.
• La localización subcelular abarca la membrana plasmática, el retículo endoplásmico, el aparato de Golgi, los endosomas y el núcleo; el receptor también puede ser secretado. Las modificaciones postraduccionales incluyen glicosilación, fosforilación, ubiquitinación y palmitoilación.
• EGFR actúa como receptor celular huésped para la entrada del virus de la hepatitis C (VHC) en los hepatocitos, facilitando la formación del complejo CD81-CLDN1.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 335–525 del dominio extracelular del EGFR humano, por lo que este anticuerpo conjugado con APC es muy adecuado para detectar EGFR de superficie mediante citometría de flujo directa.
• Dado que EGFR se expresa de forma ubicua, incluya controles de isotipo apropiados y considere utilizar una línea celular positiva para EGFR conocida (por ejemplo, A431 o HeLa) para la configuración inicial.
• Para obtener una señal óptima, titule el anticuerpo para determinar la mejor concentración de tinción y valídelo en sus condiciones experimentales específicas.
• Si realiza co-tinción con otros fluoróforos, verifique la compatibilidad espectral y realice controles de compensación.

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