Anticuerpo Monoclonal APC Conejo anti-Humano NT5E/CD73 para Citometría de Flujo - P21589

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de NT5E/CD73

• Actividad enzimática principal: NT5E/CD73 es una 5'-nucleotidasa que hidroliza nucleósidos monofosfatos extracelulares en nucleósidos y fosfato inorgánico, con una fuerte preferencia por el AMP sobre otros sustratos. Este paso es limitante en la generación de adenosina inmunosupresora a partir de ATP.
  Referencias relacionadas:
  PMID:21933152 PMID:22997138 PMID:23142347 PMID:34403084
• Especificidad por el sustrato: Además del AMP, la enzima también puede actuar sobre IMP, UMP, GMP, CMP y varios desoxinucleótidos (dAMP, dCMP, dTMP), así como NAD y NMN, aunque los ribonucleótidos monofosfatos son los sustratos preferidos.
• Localización subcelular: CD73 se une a la hoja externa de la membrana plasmática a través de un ancla de glucosilfosfatidilinositol (GPI) en el extremo C-terminal, posicionando su sitio activo en el espacio extracelular para regular los pools de nucleótidos pericelulares.
• Modificaciones postraduccionales: La proteína está N-glicosilada y contiene puentes disulfuro estructuralmente importantes. Su unión a la membrana depende completamente del ancla GPI.
• Características estructurales: Pertenece a la familia de las 5'-nucleotidasas y requiere zinc y otros iones metálicos divalentes para su actividad catalítica. La molécula existe como un homodímero en la superficie celular.
• Relevancia en enfermedades: Las mutaciones en NT5E se asocian con la calcificación arterial por deficiencia de CD73 (ACDC), un trastorno genético raro, y la proteína es un prominente objetivo de punto de control inmunitario en oncología.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno cubre todo el dominio extracelular (aminoácidos 27–547), que incluye las regiones catalítica y de unión al sustrato. Este diseño favorece el reconocimiento de CD73 nativo y correctamente plegado en células vivas.
• Para citometría de flujo, considere titular el anticuerpo para determinar la concentración óptima de tinción para su tipo celular de interés. Incluya controles isotípicos apropiados y colorantes de viabilidad.
• CD73 se libera o se desprende en vesículas extracelulares en algunos sistemas; asegúrese de que la preparación de la muestra minimice el daño celular para evitar señales falsas negativas.
• Este conjugado APC es adecuado para paneles multiplex; verifique la configuración de compensación al combinarlo con otros fluoróforos.

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