Anticuerpo monoclonal de conejo anti-CD366 (TIM-3) de ratón conjugado con APC para citometría de flujo - Q8VIM0

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de CD366 (TIM-3)

• El homólogo 2 del receptor celular del virus de la hepatitis A (HAVCR2), también conocido como proteína 3 que contiene el dominio de inmunoglobulina y mucina de las células T (TIM-3) o proteína de membrana de las células T 3, es una glucoproteína transmembrana de tipo I perteneciente a la superfamilia de las inmunoglobulinas. El splicing alternativo produce isoformas, y la secuencia canónica de ratón tiene un peso molecular calculado de aproximadamente 31 kDa (22 kDa observados debido a la glicosilación).
• Funciona como un receptor inmunomodulador con funciones generalmente inhibitorias, suprimiendo las respuestas autoinmunitarias y aloinmunitarias mediadas por los linfocitos T colaboradores de tipo 1 (Th1) y promoviendo la tolerancia inmunológica (PubMed:14556006, PubMed:18006747). En las células T CD8+, atenúa la señalización del TCR al bloquear las actividades promotoras de NF-kappaB y NFAT, reduciendo la secreción de IL-2 (por similitud). Referencias relacionadas: PMID:14556006 PMID:18006747
• Sin embargo, se han descrito funciones activadoras dependientes del contexto, incluido el aumento de la señalización del TCR en las células T a través de ZAP70, LCP2, LCK y FYN (PubMed:21807895), así como el refuerzo de las respuestas de las células T CD8+ durante una infección aguda (PubMed:24567532). En las células asesinas naturales (NK), actúa como correceptor para potenciar la producción de IFN-gamma, pero también puede suprimir la citotoxicidad en función de las condiciones (PubMed:25337993). Referencias relacionadas: PMID:21807895 PMID:24567532 PMID:25337993
• TIM-3 es un receptor de LGALS9 (galectina-9). Esta interacción provoca la supresión de las respuestas de las células T y la apoptosis mediante la fosforilación de HAVCR2 y su disociación de BAG6 (PubMed:22863785). También contribuye a la inmunidad innata al estimular la secreción de IL-1β por los macrófagos y restringir el crecimiento bacteriano intracelular tras la unión a LGALS9 en macrófagos infectados por Mycobacterium tuberculosis (PubMed:20937702). Referencias relacionadas: PMID:22863785 PMID:20937702
• Además, TIM-3 se une a la fosfatidilserina (PtSer) de manera dependiente del calcio, mediando la fagocitosis de células apoptóticas por las células dendríticas (PubMed:20083673, PubMed:19224762). En las células dendríticas infiltrantes de tumores, suprime las respuestas inmunitarias innatas mediadas por ácidos nucleicos al interactuar con HMGB1 (PubMed:22842346). Referencias relacionadas: PMID:20083673 PMID:19224762 PMID:22842346
• La localización subcelular incluye la membrana plasmática, las uniones celulares y una forma secretada. Las modificaciones postraduccionales incluyen enlaces disulfuro, glicosilación y fosforilación, que regulan su función y sus interacciones de señalización.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde al dominio extracelular (aminoácidos 20-191), lo que garantiza el reconocimiento del receptor nativo en la superficie celular y lo hace adecuado para la citometría de flujo.
• Considere titular el anticuerpo para determinar la concentración óptima de tinción para su tipo celular específico, ya que los niveles de expresión de TIM-3 varían según el estado de activación.
• Dado que TIM-3 se expresa en células T activadas, macrófagos, células dendríticas, células NK y mastocitos, valide el anticuerpo en el sistema de muestras correspondiente e incluya controles de isotipo adecuados.
• Para la citometría de flujo, utilice un colorante de viabilidad para excluir las células muertas, ya que TIM-3 puede unirse a la fosfatidilserina en células apoptóticas, lo que podría causar una tinción inespecífica.

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