Anticuerpo Monoclonal de Conejo Anti-CD3E con APC/Cianina7 para Citometría de Flujo Intracelular - P07766

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de CD3E

• El CD3E humano codifica la cadena épsilon de CD3, un componente central del complejo TCR-CD3 en los linfocitos T, esencial para las respuestas inmunitarias adaptativas (PubMed:15294938, PubMed:15546002, PubMed:2470098).
  Referencias relacionadas: PMID:15294938, PMID:15546002, PMID:2470098
• Tras la interacción del TCR con células presentadoras de antígenos, los motivos ITAM citoplásmicos de CD3E son fosforilados por quinasas de la familia Src (LCK/FYN), creando sitios de acoplamiento para ZAP70 e iniciando cascadas de señalización descendente (PubMed:2470098, PubMed:40592325).
  Referencias relacionadas: PMID:2470098, PMID:40592325
• CD3E es crítico para el desarrollo adecuado de las células T, participando tanto en la selección positiva como negativa en el timo (Por similitud).
• La proteína también regula la expresión superficial del TCR-CD3 mediando la internalización del receptor y su regulación negativa a través de motivos de endocitosis en su región citosólica (PubMed:10384095, PubMed:26507128).
  Referencias relacionadas: PMID:10384095, PMID:26507128
• Más allá de la señalización canónica del TCR, CD3E actúa como receptor para ITPRIPL1, que inhibe la activación de las células T reclutando NCK1 y bloqueando la interacción con ZAP70 y la vía ERK-NFkB (PubMed:12110186, PubMed:38614099).
  Referencias relacionadas: PMID:12110186, PMID:38614099
• CD3E es una glicoproteína transmembrana de tipo I de un solo paso localizada en la membrana celular; contiene un dominio extracelular similar a la inmunoglobulina, una hélice transmembrana y una cola citoplásmica con ITAMs.
• La proteína madura tiene un peso molecular aparente de ~23 kDa (masa calculada por UniProt: 23.147 Da) y está sujeta a fosforilación en los residuos de tirosina de los ITAM.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Este anticuerpo está conjugado con APC/Cianina7 y validado para citometría de flujo intracelular (FC intra); fije y permeabilice las células según su protocolo estándar antes de la tinción.
• El inmunógeno abarca los aminoácidos 50–150 dentro del dominio extracelular de CD3E; verifique la especificidad comparando muestras positivas (p. ej., PBMCs humanas) y negativas (CD3E knockout) o mediante preincubación con péptido de bloqueo.
• Titule el anticuerpo para determinar la concentración óptima de tinción para su muestra; use los controles de isotipo apropiados y la compensación de fluorescencia al construir paneles multicolores.
• Dado que la expresión superficial de CD3E se regula negativamente rápidamente tras la activación de las células T, confirme el estado de activación celular y asegure una permeabilización adecuada para detectar las reservas intracelulares si es necesario.

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