Anticuerpo monoclonal de conejo anti-EGFR humano conjugado con APC/Cyanine7 para citometría de flujo - P00533

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización del EGFR

• El EGFR es una tirosina cinasa receptora (RTK) de la familia ErbB, también conocida como HER1 o c-ErbB-1, codificada por el gen EGFR.
• Se une a ligandos de la familia del EGF (por ejemplo, EGF, TGF-alfa, AREG, epigen, betacelulina, epirregulina, HB-EGF), que desencadenan la dimerización del receptor y la autofosforilación. Referencias relacionadas: PMID:12297049 PMID:15611079 PMID:17909029
• El EGFR activado transmite señales a través de las cascadas RAS-RAF-MEK-ERK, PI3K-AKT, PLCgamma-PKC, STAT y NF-kappa-B. Referencias relacionadas: PMID:10805725 PMID:27153536 PMID:2790960 PMID:11116146
• Fosforila directamente RGS16 y MUC1, vinculándose con la señalización de GPCR y la adhesión celular. Referencias relacionadas: PMID:11602604 PMID:11483589
• El EGFR regula positivamente la migración celular mediante su interacción con CCDC88A/GIV. Referencias relacionadas: PMID:20462955
• Una isoforma alternativa (isoforma 2) puede antagonizar la señalización del EGF.
• Se localiza en la membrana celular, el RE, el aparato de Golgi, el núcleo y el endosoma, y también se secreta. Se expresa de forma ubicua; la isoforma 2 se encuentra en cánceres de ovario.
• La proteína experimenta amplias modificaciones postraduccionales (glucosilación, fosforilación, etc.) y actúa como receptor de entrada del VHC.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno (aa 335-525) se encuentra dentro del dominio extracelular de unión al ligando, lo que permite detectar el EGFR en la superficie celular mediante citometría de flujo sin permeabilización.
• Para la citometría de flujo, realice una titulación del anticuerpo para identificar la concentración de tinción óptima para su tipo celular específico.
• Incluya un control de isotipo adecuado y una discriminación de células vivas/muertas para garantizar una señal específica.
• Dado que APC/Cyanine7 es un colorante tándem, utilice controles de compensación adecuados en paneles multicolor; evite la exposición prolongada a la luz y los fijadores que puedan afectar la estabilidad del fluoróforo.
• Valide la especificidad de la tinción utilizando líneas celulares negativas para EGFR o ensayos de competencia con ligandos.

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