Anticuerpo monoclonal APC/Cianina7 conejo anti-CD8a humano/macaco para citometría de flujo - P01732

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de CD8a

• Cadena alfa de glucoproteína CD8 de superficie de linfocitos T (CD8A) es una glucoproteína de membrana integral que funciona como correceptor para las moléculas MHC de clase I. Interactúa con el receptor de linfocitos T (TCR) y el MHC I en las células presentadoras de antígeno, reclutando la quinasa Src LCK para activar vías de señalización intracelulares esenciales para la activación de linfocitos T y las respuestas citotóxicas.
• CD8A puede existir como un heterodímero unido por enlaces disulfuro con CD8B o como un homodímero. Los heterodímeros son típicos de los linfocitos T derivados del timo, mientras que los homodímeros se expresan en células NK, linfocitos T de memoria, linfocitos intraepiteliales, monocitos y células dendríticas.
• Este mecanismo de correceptor permite a los linfocitos T citotóxicos (CTL) reconocer y eliminar células infectadas o tumorales, cumpliendo un papel fundamental en la inmunidad adaptativa contra amenazas externas e internas.
• En las células NK, los homodímeros de CD8A promueven la supervivencia y facilitan la conjugación con múltiples células diana, potenciando la lisis serial.
• CD8A se expresa en un subconjunto de células asesinas naturales, linfocitos T de memoria y células dendríticas plasmacitoides, estas últimas tras estimulación viral como el virus del herpes simple tipo 1, lo que resalta su papel en la defensa inmune temprana.
• La proteína sufre modificaciones postraduccionales que incluyen la formación de enlaces disulfuro, glicosilación y palmitoilación, que son críticas para su localización en membrana y su función. El empalme alternativo produce isoformas tanto unidas a membrana como secretadas.
• La localización subcelular incluye la membrana celular y la secreción extracelular; un péptido señal dirige su síntesis hacia la vía secretora.

Guía experimental y consejos técnicos

• Para citometría de flujo, una dilución inicial típica de 1:50 a 1:200 suele ser efectiva; realice una titulación en el tipo celular correspondiente para determinar la concentración óptima.
• Utilice controles de compensación adecuados y proteja el anticuerpo conjugado de la exposición prolongada a la luz para mantener la estabilidad del fluoróforo.
• Tiña células vivas en tampón de tinción frío sin permeabilización, ya que CD8a es un antígeno de superficie celular.
• Incluya un control de isotipo o tinción con marcador congénico para un enmascaramiento preciso de las poblaciones CD8+, especialmente al analizar subconjuntos de linfocitos T o células NK.
• Este anticuerpo ha sido validado para reconocer CD8a tanto humano como de macaco cynomolgo. Los usuarios que trabajen con reactividad entre especies deben confirmar la reactividad en su sistema experimental específico.

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