Anticuerpo monoclonal APC/Cianina7 de rata anti-ratón CD45R/B220 para CF - P06800

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de CD45R/B220 (CD45)

• CD45, designada como tirosina-proteína fosfatasa de tipo receptor C, es una glicoproteína transmembranal también conocida como antígeno común de leucocitos (L-CA), Ly-5 o T200. Actúa como un regulador esencial de la activación y diferenciación de los linfocitos.
• Como tirosina-proteína fosfatasa, CD45 es esencial para la activación de linfocitos T a través del receptor de antígeno. Regula positivamente la coactivación de linfocitos T al unirse a DPP4, facilitando la transducción de señales.
• La región intracelular contiene dos dominios de fosfatasa en tándem. El primer dominio (D1) posee actividad catalítica, mientras que el segundo dominio (D2) influye en la especificidad de sustrato de D1, ajustando finamente la salida de la señal.
• Durante la activación de linfocitos T, CD45 recluta y desfosforila moléculas de señalización clave, incluidas SKAP1 y FYN. También desfosforila a LYN, modulando así la actividad de la quinasa LYN y las vías de señalización posteriores.
• En la interfaz entre las células presentadoras de antígeno y los linfocitos T, CD45 interactúa con CLEC10A en las células dendríticas inmaduras. Esta interacción, que involucra a CD45 portador de antígeno Tn en los linfocitos T efectores, modula el umbral de activación de los linfocitos T para limitar la autoreactividad.
• CD45 se localiza en la membrana celular, las balsas de membrana y las sinapsis inmunológicas, lo que la sitúa en el centro de la señalización inmune. El empalme alternativo genera múltiples isoformas; la isoforma B220, reconocida por este anticuerpo, se expresa predominantemente en los linfocitos B y es un marcador clásico del linaje de células B.
• Palabras clave: empalme alternativo, membrana celular, glicoproteína, hidrolasa, membrana, fosfoproteína, fosfatasa de proteínas, sinapsis, transmembranal, hélice transmembranal.

Guía experimental y consejos técnicos

• Este anticuerpo se suministra como conjugado APC/Cianina7, optimizado para citometría de flujo (FC). Verifique las compensaciones de fluorescencia usando controles teñidos individualmente e incluya un control de isotipo apropiado para establecer los umbrales de selección.
• El inmunógeno consiste en proteína recombinante de CD45R/B220 de ratón. Para obtener una tinción óptima, valore la titulación del anticuerpo en la matriz biológica correspondiente (por ejemplo, suspensiones de células de bazo o nódulos linfáticos de ratón) para determinar la concentración que produzca una señal específica máxima con un fondo mínimo.
• Tenga cuidado al diseñar paneles multicolores para evitar superposición espectral; APC/Cianina7 generalmente se excita con un láser de 635 nm y emite en el canal rojo lejano, lo que requiere compensación con otros fluoróforos en ese rango.
• Valide la expresión en el sistema de muestra previsto, como los tejidos linfoides de ratón, donde B220 se expresa altamente en las células B. Para aplicaciones no estándar, se recomiendan experimentos piloto.

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