APOA1 pAb de conejo para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P02647

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de APOA1

• La apolipoproteína A-I (APOA1) es el componente proteico principal de las lipoproteínas de alta densidad (HDL) del plasma y también se encuentra en los quilomicrones.
• Juega un papel central en el transporte inverso de colesterol al promover el eflujo de colesterol desde los tejidos y actuar como cofactor de la lecitina colesterol aciltransferasa (LCAT), facilitando la esterificación y la eliminación del colesterol.
• Como parte del complejo de proteína activadora de espermatozoides del plasma seminal (SPAP), la APOA1 contribuye a la activación de la motilidad de los espermatozoides.
• La APOA1 es una proteína secretada sintetizada principalmente en el hígado y el intestino delgado, circulando en el plasma como componente de las partículas de HDL.
• La proteína sufre modificaciones oxidativas en Met-110 y Met-136; estas formas oxidadas están elevadas en personas con mayor riesgo de enfermedad arterial coronaria, incluidos los portadores del genotipo eNOSa/b y los fumadores, y se enriquecen en lesiones aórticas con el aumento de la gravedad de la enfermedad.
• La APOA1 pertenece a una familia de apolipoproteínas involucradas en el transporte y metabolismo de lípidos, con anotaciones que la vinculan con el metabolismo del colesterol, el metabolismo de los esteroides y la aterosclerosis.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen glicación, fosforilación, palmitoilación y nitración, que pueden modular su función y roles patológicos en la amiloidosis y la neuropatía.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a la secuencia de la proteína madura (aminoácidos 25-267), cubriendo una gran parte de APOA1; esta región se conserva entre humanos, ratones y ratas, lo que respalda la reactividad cruzada informada.
• Para la transferencia Western (Western blotting), se predice que APOA1 migre a aproximadamente 28 kDa, pero las modificaciones postraduccionales y la asociación con partículas HDL pueden causar desplazamientos; valide el tamaño de la banda en su sistema de muestra utilizando controles positivos apropiados (p. ej., plasma humano, lisados de hígado).
• En inmunohistoquímica (IHC-P), la APOA1 se localiza principalmente en el espacio extracelular y el citoplasma de los hepatocitos y enterocitos; optimice la recuperación de antígenos y considere la tinción simultánea con marcadores de HDL para confirmar la especificidad.
• Para inmunofluorescencia (IF/ICC), tenga en cuenta que la APOA1 es secretada; la tinción intracelular puede reflejar proteína recién sintetizada en el retículo endoplasmático/Golgi; use condiciones sin suero o pulsos de persecución (pulse-chase) para mejorar la detección.
• El anticuerpo ha sido validado para ELISA; debido a su naturaleza policlonal, puede reconocer múltiples epítopos, ofreciendo potencialmente una mayor sensibilidad en configuraciones de ELISA sándwich cuando se empareja con un anticuerpo de captura adecuado.
• Siempre incluya controles de especies relevantes (humano, ratón, rata) y tejidos (hígado, intestino delgado, plasma) para confirmar la especificidad experimental.

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