Anticuerpo Policlonal de Conejo ASC/TMS1 para WB, IF, IHC-P, ELISA - Q9ULZ3

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de ASC/TMS1

• ASC/TMS1 (proteína asociada a apoptosis con un dominio CARD similar a una mota), también conocida como PYCARD, CARD5 o TMS-1, es una proteína adaptadora de 22 kDa que comprende un dominio pirina (PYD) en el extremo N-terminal y un dominio de reclutamiento de caspasa (CARD) en el extremo C-terminal.
• Actúa como un andamio central del inflamasoma, conectando sensores NLR (NLRP1, NLRP3, NLRC4) o AIM2 con la procaspasa-1, impulsando así la activación de la caspasa-1, la maduración de IL-1β e IL-18, y la muerte celular piroptótica. Referencias relacionadas: PMID:15030775, PMID:16982856, PMID:17349957, PMID:24630722
• ASC media la apoptosis promoviendo el clivaje dependiente de caspasa-8 de BID, la translocación mitocondrial de BAX y la posterior activación de caspasa-9 y -3, a menudo de forma independiente de FADD. Referencias relacionadas: PMID:11103777, PMID:12646168, PMID:14730312, PMID:16964285
• En el núcleo, ASC puede modular la señalización de NF-κB inhibiendo el complejo IKK y compitiendo con RIPK2, afinando así la expresión de genes inflamatorios. Referencias relacionadas: PMID:12486103, PMID:16585594
• ASC se localiza en múltiples compartimentos subcelulares, incluyendo citoplasma, motas de inflamasoma, retículo endoplásmico, mitocondrias, núcleo y aparato de Golgi, lo que es consistente con sus roles versátiles en la señalización inmune y la apoptosis.
• Se expresa ampliamente a niveles bajos, con mayor abundancia en leucocitos de sangre periférica, pulmón, intestino delgado, bazo, timo y colon. Su expresión a menudo se silencia por metilación del promotor en tumores, alineándose con su actividad reportada como supresor tumoral. Referencias relacionadas: PMID:23229815
• ASC está sujeta a modificaciones postraduccionales regulatorias, incluyendo ubiquitinación y fosforilación, que controlan el ensamblaje del inflamasoma y la intensidad de la señal.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno abarca la región central (aa 50–195) que conecta los dominios PYD y CARD, lo que puede conferir reactividad tanto contra ASC de longitud completa como contra variantes de empalme; considere validar la especificidad mediante controles de knockdown o knockout.
• En Western blot, se espera una banda predominante alrededor de 22 kDa; utilice lisados de control positivo de células THP‑1 o células mononucleares de sangre periférica humana, e incluya inhibidores de proteasas para minimizar la degradación.
• Para inmunofluorescencia e ICC, los agregados similares a motas son una característica distintiva de los inflamasomas activados; la tinción conjunta con anticuerpos contra NLRP3, AIM2 o caspasa‑1 puede confirmar la formación del inflamasoma. Las condiciones de fijación y permeabilización deben optimizarse para el tipo celular y el estado de activación.
• En IHC‑P (tejidos incluidos en parafina), se recomienda la recuperación antigénica en buffer de citrato (pH 6.0) y el bloqueo de peroxidasas endógenas; tejidos con inflamación conocida (p. ej., colon inflamado, amígdala) sirven como controles positivos adecuados.
• Para aplicaciones de ELISA, emparejar este anticuerpo policlonal con un anticuerpo monoclonal de captura puede mejorar la señal; valide la linealidad y especificidad del ensayo con proteína ASC recombinante.
• Este anticuerpo detecta ASC de humano, ratón y rata; sin embargo, la reactividad cruzada puede variar según el formato del ensayo, por lo que se recomienda incluir validación específica de especie.

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