Anticuerpo policlonal de conejo contra histona H3 dimetilada asimétricamente (R17) – Q16695/P68431 | WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la histona H3

La histona H3 es un componente central del nucleosoma, que envuelve y compacta el ADN en cromatina. Este empaquetamiento limita la accesibilidad del ADN a la maquinaria celular necesaria para procesos como la transcripción, la reparación del ADN, la replicación del ADN y la estabilidad cromosómica. Por lo tanto, las histonas desempeñan un papel central en la regulación de la expresión génica y la integridad del genoma. Referencias relacionadas: UniProtKB Q16695 / P68431

La función de las histonas está fuertemente regulada por un conjunto diverso de modificaciones postraduccionales (PTM), a menudo denominadas "código de histonas". Estas PTM incluyen acetilación, metilación, fosforilación y ubiquitinación, entre otras, y orquestan la remodelación de los nucleosomas y el reclutamiento de proteínas efectoras. Entre estas modificaciones, la metilación de la arginina, particularmente la dimetilación asimétrica, es una marca epigenética clave asociada con la activación y el silenciamiento transcripcional.

La histona H3 existe en múltiples isoformas. La H3.1 (P68431), dependiente de la replicación, se expresa ampliamente en todos los tejidos, mientras que la H3.1t (Q16695) se expresa específicamente en células testiculares, lo que sugiere funciones especializadas en la espermatogénesis. Ambas isoformas se localizan en el núcleo y los cromosomas.

La dimetilación asimétrica de la histona H3 en la arginina 17 (R17; posición 18 en la secuencia precursora, incluida la metionina iniciadora) es catalizada por la proteína arginina metiltransferasa CARM1 (PRMT4). Esta modificación ha sido implicada en la regulación transcripcional y es un marcador bien estudiado de los estados de cromatina activa. Referencias relacionadas: PMID:15345777, PMID:15471871, PMID:16497732

Este anticuerpo reconoce específicamente la histona H3 cuando está dimetilada asimétricamente en la R17. No detecta la H3 no modificada ni otros estados de metilación, como la arginina dimetilada simétricamente o monometilada en este sitio, lo que lo convierte en una herramienta valiosa para estudiar la señalización mediada por CARM1 y la regulación epigenética.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético diseñado alrededor de la dimetilarginina asimétrica en la R17 de la histona H3 humana. Al realizar un western blot (WB) o inmunohistoquímica (IHC-P), considere utilizar lisados celulares o de tejido que se sepa que expresan esta modificación (por ejemplo, células HeLa o testículo de ratón) como controles positivos.
• Dado que se prevé que este anticuerpo tenga una amplia reactividad cruzada más allá de humano, ratón y rata, puede ser adecuado para detectar la modificación en otras especies. Sin embargo, se recomienda la validación en el sistema de muestra correspondiente.
• Para ELISA, asegúrese de que el antígeno de recubrimiento contenga el epítopo dimetil-R17 asimétrico, ya que el anticuerpo no reconocerá péptidos no modificados o metilados de forma diferente.
• Dado que el anticuerpo es policlonal, la variabilidad entre lotes es un factor a considerar; incluya controles negativos apropiados (por ejemplo, péptido H3 no modificado) para confirmar la especificidad.

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