Anticuerpo policlonal de conejo anti-Histona H3-R26 Dimetilada Asimétricamente (Q16695 / P68431) para WB, IF/ICC, ELISA

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Histona H3

La histona H3 es un componente central del nucleosoma, que envuelve y compacta el ADN en cromatina. Esta estructura limita la accesibilidad del ADN a las maquinarias celulares que lo requieren como plantilla, desempeñando así un papel central en la regulación de la transcripción, la reparación del ADN, la replicación del ADN y la estabilidad cromosómica. La accesibilidad del ADN se regula a través de un conjunto complejo de modificaciones postraduccionales (MPT) de las histonas, denominadas colectivamente "código de histonas", así como mediante el remodelado de nucleosomas.

La histona H3.1 canónica, codificada por múltiples genes como H3C1, H3C2, H3C3, etc., se expresa ampliamente. En contraste, la histona H3.1t (también conocida como H3-4 o HIST3H3) se expresa específicamente en células testiculares.

A nivel subcelular, la histona H3 se localiza principalmente en el núcleo y en los cromosomas.

La histona H3 experimenta MPT extensas y variadas, incluyendo acetilación, metilación, fosforilación, citrulinación, entre otras. Los residuos de arginina pueden ser metilados para formar dimetilarginina asimétrica (ADMA) por las proteína-arginina metiltransferasas (PRMT) como PRMT6 y CARM1, que actúan sobre residuos específicos (p. ej., R3, R18) y modulan la estructura de la cromatina y la expresión génica. Este anticuerpo está diseñado para reconocer específicamente la dimetilación asimétrica en la arginina 26 (R26) de la histona H3.

Referencias relacionadas: PMID:17898714, PMID:18077460, PMID:15345777, PMID:15471871

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético que contiene R26 dimetilada asimétricamente, diseñado para conferir alta especificidad para esta modificación. Los investigadores deben considerar verificar la especificidad mediante ensayos de competición con péptidos y comparando las señales con péptidos no modificados o modificados de manera diferente.
• Para Western blotting, se espera una banda específica de aproximadamente 15 kDa. Los extractos enriquecidos en histonas o las proteínas extraídas con ácido pueden mejorar la detección. Los controles positivos derivados de células tratadas con inhibidores de histona deacetilasas (p. ej., butirato de sodio) pueden ayudar a confirmar la reactividad.
• En inmunofluorescencia/inmunocitoquímica (IF/ICC), se deben determinar las condiciones óptimas de permeabilización y fijación. Dada la amplia reactividad cruzada predicha, se recomienda la validación en la especie y tejido específicos de interés.
• Para aplicaciones de ELISA, utilice el péptido inmunizante como control positivo y un péptido no modificado como control negativo para confirmar la unión específica de la modificación.
• Como con todos los anticuerpos específicos para modificaciones postraduccionales, la consistencia entre lotes y las condiciones de reacción deben ser monitoreadas en el contexto del sistema experimental específico.

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