Anticuerpo policlonal de conejo anti-DiMetil-Asimétrico-Histona H3-R8 (Q16695 / P68431) – Validado para WB, IHC-P, ChIP, ELISA

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Histona H3 (DiMetil-Asimétrico-R8)

La histona H3 es un componente central del nucleosoma, que envuelve y compacta el ADN en cromatina, limitando la accesibilidad del ADN a las maquinarias celulares. Las histonas juegan un papel central en la regulación de la transcripción, la reparación del ADN, la replicación del ADN y la estabilidad cromosómica. La accesibilidad del ADN se regula dinámicamente a través de un conjunto complejo de modificaciones postraduccionales (PTM), conocidas colectivamente como el código de histonas, y mediante el remodelado de nucleosomas. Referencias relacionadas: UniProt Q16695, UniProt P68431

Entre las numerosas PTM en la histona H3, la metilación de arginina es catalizada por las proteínas arginina metiltransferasas (PRMT) y puede ocurrir en formas asimétricas o simétricas. La dimetilación asimétrica de H3R2 está mediada por PRMT6 PMID:17898714, mientras que la dimetilación asimétrica de H3R17 es catalizada por CARM1 PMID:15345777. Se sabe que el residuo H3R8 es simétricamente dimetilado por PRMT5; sin embargo, también se ha reportado la diMetil-Asimétrica-H3R8 como una marca epigenética específica. Este anticuerpo se dirige al estado de dimetilación asimétrica en R8, permitiendo discriminar esta modificación.

La histona H3 se localiza en el núcleo y la cromatina. La isoforma canónica H3.1 (P68431) se expresa de manera ubicua, mientras que la variante H3.1t (Q16695) se expresa específicamente en células testiculares. Referencias relacionadas: PMID:16567635 (citrulinación en R8/R2/R17)

Orientación Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético que presenta dimetilación asimétrica en R8; se espera que el anticuerpo reconozca específicamente esta modificación. Sin embargo, debido a la homología de secuencia, puede ocurrir reactividad cruzada con otras variantes o sitios de histona H3 metilados. Valide la especificidad utilizando competición con péptido, knockout/knockdown o mutagénesis dirigida al sitio.
• Para Western blot, el peso molecular esperado es ~15 kDa. Las histonas son altamente básicas; use geles ácido-urea o incluya controles apropiados para resolver las formas modificadas.
• Para ChIP, considere que la diMetil-Asimétrica-H3R8 puede marcar estados de cromatina específicos; optimice las condiciones de entrecruzamiento y fragmentación.
• Las aplicaciones listadas incluyen WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA y ChIP. Las diluciones deben determinarse empíricamente, y todos los ensayos deben incluir controles negativos y positivos apropiados.
• Se predice reactividad cruzada contra humano, ratón, rata y otras especies debido a la alta conservación de la histona H3. Verifique en el sistema de muestra relevante.

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