Anticuerpo Policlonal de Conejo ATF6 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P18850

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de ATF6

• ATF6 es un precursor de factor de transcripción incrustado en la membrana del retículo endoplasmático (RE). El estrés del RE desencadena su procesamiento proteolítico, liberando el fragmento N-terminal activo que se transloca al núcleo para iniciar la respuesta a proteínas desplegadas (UPR). Referencias relacionadas: PMID:10564271 PMID:11158310 PMID:11779464
• El ATF6 procesado se une a elementos de respuesta al estrés del RE (ERSE, 5'-CCAAT-N₉-CCAC[GA]-3' y ERSE II, 5'-ATTGG-N-CCACG-3') como un heterodímero con NF-Y, activando genes objetivo de la UPR. Referencias relacionadas: PMID:10564271 PMID:11158310 PMID:11779464 PMID:11163209
• ATF6 también puede regular la transcripción mediada por el factor de respuesta sérica y desempeña un papel en el desarrollo de la fóvea retiniana y la función de los conos. Referencias relacionadas: PMID:10564271 PMID:11158310 PMID:11779464 PMID:26029869
• Localización subcelular: El precursor reside en las membranas del RE y del aparato de Golgi; tras el procesamiento, el dominio del factor de transcripción se localiza en el núcleo.
• ATF6 se expresa de forma ubicua en los tejidos humanos.
• El precursor es una glucoproteína unida a N y puede ser modificado por ubiquitinación. La proteína es una proteína de membrana de paso único tipo II (ancla de señal) con su extremo N orientado hacia el citoplasma y el extremo C en la luz del RE.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a un péptido dentro de los aminoácidos 600-670 del ATF6 humano (NP_031374.2), ubicado en el dominio luminal C-terminal. Esta región está presente en el precursor de longitud completa (~75 kDa). La detección de la forma nuclear escindida (~50 kDa) puede variar dependiendo de la accesibilidad del epítopo; valídelo en modelos apropiados de estrés del RE.
• Para Western blot, se espera una banda cercana a 75 kDa para el precursor. Trate las células con inductores de estrés del RE (por ejemplo, tunicamicina, tapsigargina) para observar el procesamiento y la translocación nuclear.
• Para IHC-P, considere la recuperación de antígeno con tampón de citrato o EDTA, y confirme la especificidad de la señal con controles adecuados.
• En IF/ICC, ATF6 muestra un patrón reticular del RE/Golgi en condiciones basales y se redistribuye al núcleo después de la inducción de estrés; utilice una fijación y permeabilización adecuadas.
• Para ELISA, el anticuerpo puede utilizarse como reactivo de captura o detección; optimice las condiciones de recubrimiento y bloqueo.

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