Anticuerpo monoclonal Biotina Anti-CD4 para citometría de flujo - P01730

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de CD4

• CD4 es una glicoproteína de superficie de linfocitos T (también conocida como T4/Leu-3) codificada por el gen CD4, que pertenece a la superfamilia de las inmunoglobulinas y desempeña un papel central en la inmunidad adaptativa.
• Como coreceptor, CD4 se une a las moléculas de MHC de clase II en las células presentadoras de antígeno e interactúa con el receptor de linfocitos T (TCR) para reclutar la quinasa Src LCK, iniciando cascadas de señalización intracelular que promueven la activación de las células T auxiliares, la producción de linfocinas, la adhesión y la motilidad.
• CD4 participa en el desarrollo de las células T auxiliares tímicas y desencadena la diferenciación de monocitos en macrófagos funcionales maduros, lo que pone de relieve su papel más amplio en la maduración de las células inmunitarias.
• Es una glicoproteína de membrana integral localizada en la membrana celular, con extensas modificaciones postraduccionales que incluyen enlaces disulfuro, glicosilación, palmitoilación y fosforilación.
• CD4 se expresa altamente en las células T auxiliares y sirve como marcador definitorio de este subconjunto; también está presente en otras células inmunitarias como macrófagos, células dendríticas y células NK.
• CD4 es el receptor principal del virus de la inmunodeficiencia humana tipo 1 (VIH-1) (PubMed:12089508, PubMed:16331979, PubMed:2214026) y del herpesvirus humano 7 (HHV-7) (PubMed:7909607). La proteína Vpu del VIH-1 media la regulación a la baja de CD4 (PubMed:17346169). Referencias relacionadas: PMID:12089508 PMID:16331979 PMID:2214026 PMID:17346169 PMID:7909607

Orientación experimental y consejos técnicos

• La etiqueta de biotina permite la detección directa sin necesidad de anticuerpos secundarios; para citometría de flujo (CF) se recomienda el uso de estreptavidina conjugada con fluoróforo para amplificar la señal.
• Este anticuerpo se obtiene frente a la proteína CD4 humana recombinante; se ha observado reactividad cruzada con macaco cínomolgo, pero se recomienda la validación en el sistema de muestras correspondiente debido a posibles diferencias de secuencia.
• Para CF, realice la titulación del anticuerpo para determinar la concentración óptima que proporcione la mejor relación señal-ruido e incluya controles de isotipo adecuados.
• Como anticuerpo monoclonal de origen de conejo, tenga en cuenta las posibles interacciones con los receptores Fc al teñir células mieloides humanas; se pueden considerar pasos de bloqueo.
• CD4 es una proteína de superficie celular; para la tinción intracelular, optimice las condiciones de fijación y permeabilización para preservar la accesibilidad del epítopo.

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