Anticuerpo monoclonal biotinilado de conejo anti-CD14 humano/mona para CF - P08571

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de CD14

• El antígeno de diferenciación de monocitos CD14, también conocido como antígeno My23 o glicoproteína rica en leucina específica de células mieloides, se expresa en monocitos, macrófagos y de forma débil en granulocitos.
• CD14 actúa como correceptor del lipopolisacárido bacteriano (LPS), cooperando con LBP para transportar el LPS monomérico al complejo LY96/TLR4, mediando así las respuestas inmunitarias innatas. Referencias relacionadas: PMID:1698311 PMID:23264655 PMID:20133493 PMID:22265692
• Tras la unión al LPS, CD14 activa la señalización dependiente de MyD88/TIRAP/TRAF6, lo que conduce a la activación de NF-κB, la secreción de citoquinas y la respuesta inflamatoria. Referencias relacionadas: PMID:8612135
• CD14 también funciona como correceptor de los heterodímeros TLR2:TLR6 y TLR2:TLR1 en respuesta a lipopéptidos diacilados y triacilados, respectivamente; estos complejos señalan desde la superficie celular y posteriormente se dirigen al Golgi mediante una vía dependiente de balsas lipídicas. Referencias relacionadas: PMID:16880211
• Se une a LDL electronegativo [LDL(-)] y media la liberación de citoquinas inducida por LDL(-). Referencias relacionadas: PMID:23880187
• La localización subcelular incluye membrana celular, forma secretada, balsas de membrana y aparato de Golgi.
• Especificidad tisular: detectado en macrófagos (a nivel de proteína), expresado fuertemente en monocitos, débilmente en granulocitos y en la mayoría de los macrófagos tisulares. Referencias relacionadas: PMID:1698311
• Características estructurales: contiene repeticiones ricas en leucina, es una glicoproteína anclada a GPI con un péptido señal y tiene un peso molecular predicho de aproximadamente 40 kDa.

Guía experimental y consejos técnicos

• Utilice el anticuerpo biotinilado para la detección directa por citometría de flujo de CD14 superficial en leucocitos de humano o macaco cangrejero; asegure un bloqueo adecuado de FcR para minimizar la unión inespecífica.
• Valide los patrones de tinción utilizando poblaciones celulares positivas (por ejemplo, monocitos) y negativas (por ejemplo, linfocitos) apropiadas; considere los controles de isotipo.
• La etiqueta de biotina permite una detección flexible con conjugados de estreptavidina fluorescente; titule el conjugado de estreptavidina para optimizar la relación señal-ruido.
• Para la detección intracelular de CD14 en el Golgi o la vía secretora, se requiere un paso de permeabilización; tenga en cuenta que la aplicación principal es la tinción superficial.
• Almacene el anticuerpo en las condiciones frías recomendadas (envío en bolsa de hielo) y protéjalo de la exposición prolongada a la luz para mantener la estabilidad del conjugado.

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