Anticuerpo Monoclonal Biotina Conejo anti-Ratón CD45 para Citometría de Flujo - P06800

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de CD45 (PTPRC)

• CD45 (fosfatasa de tirosina proteica tipo receptor C) es un antígeno común de leucocitos (L-CA) expresado de forma ubicua, también conocido como Ly-5 y T200. El empalme alternativo genera múltiples isoformas, incluida B220 (CD45R) que se encuentra predominantemente en linfocitos B.
• Contiene dos dominios intracelulares de fosfatasa de tirosina proteica (PTP); el primer dominio posee actividad enzimática, mientras que el segundo modula la especificidad del sustrato.
• CD45 es esencial para la activación de células T a través del receptor de antígeno, actuando como un regulador positivo de la coactivación al unirse a DPP4.
• Tras la activación de células T, CD45 recluta y desfosforila SKAP1 y FYN, y también desfosforila LYN para modular su actividad quinasa.
• En las interfaces célula presentadora de antígeno-célula T, CD45 interactúa con CLEC10A en células dendríticas inmaduras, que reconoce el CD45 modificado con antígeno Tn en células T efectoras, ajustando el umbral de activación para limitar la autorreactividad.
• Se localiza en la membrana celular, balsas de membrana y sinapsis inmunológica, en consonancia con su papel en la transducción de señales.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen una intensa glicosilación N-ligada y fosforilación en residuos de serina/treonina.
• CD45 es miembro de la familia de fosfatasas de tirosina proteica y pertenece a las PTP de tipo receptor de clase I.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Para citometría de flujo, valore el anticuerpo biotinilado en un rango de concentraciones (por ejemplo, 0,1–5 µg/prueba) para determinar el índice de tinción óptimo con su modelo celular específico y el conjugado de estreptavidina secundario.
• Incluya una tinción de control de isotipo apropiado para evaluar la unión inespecífica, especialmente cuando utilice sistemas de detección amplificados como estreptavidina-PE o estreptavidina-APC.
• Antes de su uso, valide el anticuerpo en la población de leucocitos de ratón relevante (por ejemplo, esplenocitos, células de ganglio linfático o células mononucleares de sangre periférica) para confirmar la expresión y resolución esperadas.
• La conjugación con biotina ofrece flexibilidad; considere el uso de conjugados de estreptavidina adaptados a los láseres y filtros de su instrumento para paneles monocromáticos o multicolor.
• Para la detección indirecta, asegure pasos de lavado adecuados tras la incubación primaria para reducir el anticuerpo no unido y minimizar la señal inespecífica.

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