Anticuerpo Monoclonal de Conejo anti-Ratón IgM Biotinilado para Citometría de Flujo - P01872

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Inmunoglobulina Pesada Constante mu (IgM)

• La inmunoglobulina pesada constante mu (IgM) es la región constante de la cadena pesada mu, formando los brazos de unión al antígeno de los anticuerpos IgM. Está codificada por el gen Ighm en el locus de la cadena pesada de inmunoglobulina.
• La IgM secretada (sIgM) se multimeriza predominantemente en pentámeros, con ocasionales hexámeros, permitiendo la unión de alta avidez a los antígenos. Tanto la sIgM natural (polirreactiva) como la inmune (específica de antígeno) son esenciales para las respuestas humorales efectivas, mediando el reconocimiento y eliminación de patógenos a través de receptores Fc (p. ej., FCMR) y la activación del complemento (vía clásica C1q). Referencias relacionadas: PMID:10899913, PMID:11062505, PMID:28135254, PMID:34788614
• La IgM unida a membrana sirve como componente del receptor de antígeno del complejo del receptor de células B (BCR), proporcionando una señalización tónica constitutiva para la supervivencia de las células B y mediando la señalización del pre-BCR que regula el desarrollo de las células B y la exclusión alélica.
• La IgM se encuentra tanto secretada como en la membrana celular. La sIgM se transporta a través del epitelio mucoso vía PIGR para la inmunidad mucosa, mientras que la IgM de membrana se ancla en las células B.
• Se expresa específicamente en células de linaje B: precursores de células B de médula ósea, y células B-1 y B-2 maduras.
• Las modificaciones post-traduccionales incluyen glicosilación N-ligada y puentes disulfuro intercadena esenciales para la polimerización y la estabilidad estructural. El empalme alternativo genera isoformas secretadas y unidas a membrana, y la proteína contiene dominios tipo inmunoglobulina, una hélice transmembrana y una cola citoplasmática.

Orientación Experimental y Consejos Técnicos

• Este anticuerpo conjugado con biotina detecta la IgM de ratón en citometría de flujo. Utilice un reactivo secundario estreptavidina-fluoróforo para la amplificación de la señal. Considere titular tanto el anticuerpo como el conjugado de estreptavidina para obtener un índice de tinción óptimo.
• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 105-454 de la IgM de ratón (región constante), permitiendo el reconocimiento de las formas secretadas y unidas a membrana. Para la tinción superficial de células B, use células vivas, no fijadas cuando sea posible; la fijación puede alterar la accesibilidad del epítopo.
• Incluya los controles de isotipo apropiados y el bloqueo de Fc para minimizar la unión inespecífica. No se ha informado reactividad cruzada con otras clases de inmunoglobulinas de ratón, pero se recomienda la validación en el sistema de muestra relevante.
• Para la tinción intracelular de IgM, se requiere permeabilización; valide los protocolos de fijación/permeabilización para su tipo celular específico para preservar los epítopos.

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