Anticuerpo policlonal de conejo BRD4 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - O60885

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de BRD4

• BRD4 es una proteína que contiene bromodominio que actúa como lector de cromatina, reconociendo y uniéndose específicamente a histonas acetiladas para transmitir la memoria epigenética a lo largo de las divisiones celulares y mantener la estructura de cromatina de alto orden. Referencias relacionadas: PMID:20871596 PMID:23086925 PMID:23317504 PMID:22334664 PMID:23589332

• Desempeña un papel crítico en la regulación de la transcripción al asociarse con el complejo P-TEFb y reclutarlo a los promotores de genes inducibles por señal, promoviendo así la elongación de la ARN polimerasa II. Referencias relacionadas: PMID:16109376 PMID:16109377 PMID:19596240

• BRD4 también se dirige a potenciadores distales, donde colabora con JMJD6 para formar un complejo P-TEFb activo al desplazar reguladores negativos como HEXIM1 y 7SK snRNA. Referencias relacionadas: PMID:16109376 PMID:16109377 PMID:19596240

• La proteína media directa o indirectamente la fosforilación del dominio C-terminal (CTD) de la ARN polimerasa II en la serina-2, un paso clave en la elongación transcripcional. Referencias relacionadas: PMID:23086925 PMID:22509028

• Más allá de las histonas, BRD4 reconoce a RELA acetilado, facilitando la activación transcripcional mediada por NF-kappa-B. Referencias relacionadas: PMID:19103749

• BRD4 también se recluta a los promotores diana de p53/TP53 después de la fosforilación por CK2, actuando como regulador de la transcripción dependiente de p53. Referencias relacionadas: PMID:23317504

• En la respuesta al daño del ADN, BRD4 actúa como aislador de cromatina al reclutar el complejo condensin-2 a las histonas acetiladas, limitando así la propagación de la fosforilación de H2AX.

• Subcelularmente, BRD4 se localiza en el núcleo y la cromatina; se expresa de forma ubicua en todos los tejidos, lo que refleja su papel fundamental en la biología de la cromatina y la transcripción.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno (aminoácidos 700-794 de BRD4 humano) se dirige a una región fuera de los bromodominios conservados, lo que puede ofrecer especificidad para BRD4 frente a otros miembros de la familia BET; sin embargo, la reactividad cruzada debe confirmarse en el sistema experimental correspondiente.
• Para aplicaciones de Western blot, se debe detectar una banda esperada de aproximadamente 152 kDa; optimice la dilución del anticuerpo y los tiempos de exposición para obtener resultados claros.
• En inmunofluorescencia (IF/ICC) e inmunohistoquímica (IHC-P), se espera una tinción nuclear de BRD4; asegúrese de utilizar métodos adecuados de fijación y recuperación de antígenos para preservar la accesibilidad del epitopo.
• Cuando utilice este anticuerpo en ELISA, considere usar el péptido del inmunógeno como control positivo y valide el rendimiento en diferentes tipos de muestras.

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