mAb de conejo anti-CD43 para WB, IF/ICC, ELISA - P16150

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de CD43

• La leucosi­alina (CD43, SPN) es la sialoproteína predominante de la superficie celular de los leucocitos, está fuertemente glicosilada y se expresa en múltiples isoformas.
• Regula la activación y diferenciación de las células T: regula negativamente la diferenciación Th2 y promueve la expresión de IFN-gamma por las células T, induciendo la expresión de los receptores de citocinas IFNGR e IL4R y mediando su agrupamiento con el TCR (PubMed:18036228; PubMed:24328034). Referencias relacionadas: PMID:18036228 PMID:24328034
• Actúa como un ligando principal de E-selectina responsable del desplazamiento rodante de las células Th17 sobre la vasculatura activada y de su reclutamiento durante la inflamación, mediando la adhesión específica de las células Th17 a la E-selectina (por similitud).
• Protege a las células de las señales apoptóticas y promueve la supervivencia celular.
• Se localiza en la membrana plasmática, las microvellosidades y el uropodio, y también se encuentra en el núcleo y los cuerpos de PML.
• Se expresa específicamente en la superficie celular de los timocitos, los linfocitos T, los neutrófilos, las células plasmáticas y los mielomas.
• Sufre amplias modificaciones postraduccionales, incluida la glicosilación, la fosforilación y la conjugación con ubiquitina, como se refleja en su mayor peso molecular aparente en SDS-PAGE.

Orientación experimental y consejos técnicos

• Para western blot, considere utilizar lisados de células completas de líneas celulares de leucocitos humanos (por ejemplo, Jurkat), dado el peso previsto de 40 kDa; verifique el patrón de bandas debido a la intensa glicosilación y a la variación de isoformas.
• En IF/ICC, permeabilice las células para detectar tanto las reservas de membrana como las posibles reservas nucleares; realice tinción simultánea con marcadores de orgánulos para validar la localización.
• Para ELISA, evalúe la reactividad frente a la proteína CD43 recombinante o un péptido que cubra la región del inmunógeno para confirmar la especificidad en su sistema de ensayo.
• Valide el rendimiento del anticuerpo en su sistema de muestras y aplicación pertinentes; como anticuerpo monoclonal de conejo, se espera una alta especificidad, pero realice siempre una titulación e incluya controles positivos y negativos.

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