Anticuerpo Monoclonal de Conejo Citrulina-Histona H3 (Citrulinación R8) (Q16695/P68431) para WB, DB, ELISA

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Histona H3

La histona H3 es un componente central del nucleosoma, responsable de envolver y compactar el ADN en cromatina. Este papel estructural es crítico para regular la accesibilidad del ADN y, por lo tanto, controla procesos fundamentales como la transcripción, la reparación del ADN, la replicación y la estabilidad cromosómica. Las histonas, incluida la H3, están sujetas a una compleja serie de modificaciones postraduccionales, a menudo denominadas "código de histonas", que modulan dinámicamente la estructura de la cromatina y la expresión génica.

Este anticuerpo detecta específicamente la citrulinación en la arginina 8 (R8) de la histona H3. La citrulinación, la conversión de arginina a citrulina, está mediada por peptidilarginina deiminasas (PAD) y ha sido implicada en la regulación génica, la NETosis y las enfermedades autoinmunes. Se sabe que la histona H3 se citrulina en múltiples residuos, incluidos R3, R8, R17 y R26, y estas modificaciones pueden influir en la compactación de la cromatina. Referencias relacionadas: PMID:16567635.

Los dos accesos SWISS-PROT cubiertos por este anticuerpo, Q16695 (Histona H3.1t) e P68431 (Histona H3.1), representan variantes de histonas distintas. Q16695 es una variante H3 específica de testículo expresada en células testiculares, mientras que P68431 corresponde a la histona H3.1 canónica dependiente de la replicación, que se expresa ubicuamente. Ambas se localizan en el núcleo y el cromosoma.

La histona H3 se modifica extensamente en su cola N-terminal, incluyendo acetilación, metilación, fosforilación, citrulinación y muchas otras marcas. Estas modificaciones se regulan dinámicamente y sirven como plataformas de unión para complejos modificadores de la cromatina, gobernando así la identidad celular y la respuesta a las señales ambientales.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Para Western blot (WB), considere usar de 10 a 20 µg de lisado de células enteras por carril. Valide el anticuerpo en el sistema de muestra relevante (por ejemplo, células estimuladas con citrulinación inducida) e incluya los controles positivos y negativos apropiados.
• Para dot blot (DB) y ELISA, optimice la concentración de recubrimiento del antígeno y las condiciones del tampón para garantizar la detección específica de la histona H3 citrulinada. Un péptido citrulinado sintético alrededor de la R8 puede servir como control positivo.
• Dado que la citrulinación puede ser transitoria y dependiente de enzimas, la preparación de la muestra debe preservar las modificaciones postraduccionales; considere usar inhibidores de PAD o lisis inmediata con inhibidores de fosfatasas/proteasas apropiados.
• Este anticuerpo monoclonal de conejo puede usarse para sondear la dinámica de la citrulinación en varios tipos de muestras humanas; la reactividad cruzada con otras especies se predice de amplio rango, pero los usuarios finales deben verificarla en sus modelos experimentales específicos.

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