Anticuerpo policlonal de conejo Dimethyl-eEF1A-K55 (P68104/Q05639) para WB y ELISA

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de eEF1A

• eEF1A (factor de elongación eucariota 1A) existe en dos isoformas, eEF1A1 (gen EEF1A1, GeneID: 1915) y eEF1A2 (gen EEF1A2, GeneID: 1917), ambos son factores de elongación de la traducción altamente conservados. Catalizan la unión dependiente de GTP del aminoacil-ARNt al sitio A ribosomal durante la elongación de la síntesis de proteínas PMID:26593721, PMID:26651998, PMID:36123449, PMID:36264623, PMID:36638793.
• Más allá de la traducción, eEF1A1 promueve la agrupación de actina para la organización del citoesqueleto y, en las células T auxiliares 1, forma un complejo con TXK y PARP1 para regular positivamente la transcripción de IFNG PMID:17177976. EEF1A1 también es necesaria para la traducción de proteínas virales durante la infección por SARS-CoV-2 PMID:33495306.
• EEF1A1 se expresa de forma amplia, mientras que EEF1A2 se encuentra predominantemente en el cerebro, el corazón y el músculo esquelético. Subcelularmente, EEF1A1 se localiza en el citoplasma, el núcleo, el nucléolo y la membrana celular; EEF1A2 se localiza en la membrana del retículo endoplásmico PMID:19158340, PMID:8650580, PMID:26497934, PMID:36697828.
• La lisina 55 (K55) es un sitio de dimetilación conservado (N6,N6-dimetillisina) tanto en eEF1A1 como en eEF1A2, según se ha identificado por proteómica PMID:30143613, PMID:30612740. En eEF1A2, K55 también puede estar trimetilado. Estas modificaciones pueden regular las interacciones proteicas y la fidelidad de la traducción.
• Las mutaciones en EEF1A2 están relacionadas con trastornos del neurodesarrollo como la epilepsia y la discapacidad intelectual, lo que resalta la importancia biomédica de la regulación de eEF1A2.

Guía experimental y consejos técnicos

• Este anticuerpo se generó contra un péptido de K55 dimetilado de eEF1A; debe reconocer específicamente la forma dimetil-K55. Confirme la especificidad mediante competición peptídica (dimetilado vs. no modificado) o tratando las muestras con una desmetilasa.
• Para WB, eEF1A1 (~50,1 kDa) y eEF1A2 (~50,5 kDa) migran alrededor de 50 kDa. Utilice condiciones estándar de SDS-PAGE y transferencia. Valide en líneas celulares humanas (por ejemplo, HeLa para EEF1A1, SH-SY5Y para EEF1A2).
• En ELISA, recubra con péptido dimetilado o lisado celular; incluya controles no metilados para evaluar la reactividad cruzada.
• Dado el papel de eEF1A en la traducción, la biología del cáncer y la replicación viral, este anticuerpo puede ayudar en los estudios de regulación dependiente de metilación en diversas condiciones fisiológicas y patológicas.

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