DiMethyl-Histona H3-K14 pAb de Conejo (Q16695/P68431) para WB, IF/ICC, ELISA

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Histona H3

La histona H3 es un componente central del nucleosoma, la unidad repetitiva fundamental de la cromatina. Los nucleosomas envuelven y compactan el ADN, limitando así la accesibilidad del ADN a la maquinaria celular que lo requiere como plantilla. Las histonas desempeñan un papel central en la regulación de la transcripción, la reparación del ADN, la replicación del ADN y la estabilidad cromosómica. La accesibilidad del ADN se regula mediante un conjunto complejo de modificaciones postraduccionales (el "código de histonas") y el remodelado de nucleosomas.

Este anticuerpo reconoce la forma dimetilada de la lisina 14 (K14) en la histona H3 humana. Dos isoformas principales están representadas por los accesiones SWISS Q16695 (Histona H3.1t, expresada en células testiculares) y P68431 (Histona H3.1, una variante canónica). Ambas isoformas se localizan en el núcleo y los cromosomas.

La lisina 14 es un residuo crítico dentro de la cola N-terminal de la histona H3 que sufre modificaciones postraduccionales dinámicas, incluyendo acetilación y metilación, las cuales influyen en la estructura de la cromatina y la expresión génica. La dimetilación de K14 se asocia con resultados transcripcionales específicos y es parte del paisaje regulatorio epigenético más amplio.

Referencias relacionadas: La función central del nucleosoma está respaldada por numerosos estudios estructurales y bioquímicos. Para obtener información específica sobre modificaciones, consulte: PMID:19608861, PMIDID:17194708.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un péptido dimetilado sintético alrededor de la K14. Para garantizar la especificidad dimetilada, considere validar el anticuerpo contra el péptido K14 no modificado o péptidos con mono-/tri-metilación en la K14.
• Para la transferencia Western (Western blotting), una dilución inicial puede optimizarse utilizando fracciones de extracto nuclear; la banda esperada es de ~15 kDa. Confirme la desaparición de la banda en muestras tratadas con desmetilasa de K14 si está disponible.
• En inmunofluorescencia (IF/ICC), las condiciones de fijación y permeabilización pueden afectar la accesibilidad del epítopo. Se recomienda probar la fijación con metanol frente a formaldehído e incluir un control de competencia con péptidos.
• Para ELISA, utilice el péptido inmunógeno como control positivo y un péptido K14 no modificado como control negativo para verificar la unión específica a la modificación.
• Se predice que el anticuerpo reacciona de forma cruzada con una amplia gama de especies debido a la conservación de la secuencia de la cola N-terminal de la histona H3. Valídelo en la especie de interés utilizando los controles positivos y negativos apropiados.

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