Anticuerpo Policlonal de Conejo DiMetil-Histona H3-K36 (Q16695 / P68431) para WB, IHC-P, IF/ICC, ChIP-seq

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Histona H3

• La histona H3 es un componente central del nucleosoma, que envuelve y compacta el ADN en cromatina. Esto limita la accesibilidad del ADN a la maquinaria celular y, por lo tanto, desempeña un papel central en la regulación de la transcripción, la reparación del ADN, la replicación del ADN y la estabilidad cromosómica. La accesibilidad del ADN se regula mediante un conjunto complejo de modificaciones postraduccionales, conocidas colectivamente como el código de histonas, y el remodelado de nucleosomas.
• La histona canónica H3.1 (UniProt P68431) está codificada por múltiples genes dependientes de la replicación (H3C1, H3C2, H3C3, H3C4, H3C6, H3C7, H3C8, H3C10, H3C11, H3C12). La variante H3.1t (UniProt Q16695, gen H3-4), también conocida como H3t o H3/g, se expresa en células testiculares.
• La dimetilación de la Lisina36 (numeración convencional; corresponde a la Lisina37 en la secuencia precursora) es una modificación postraduccional específica en la cola N-terminal de la histona H3. Esta modificación contribuye al código de histonas y está implicada en la elongación transcripcional y el mantenimiento de la integridad del genoma. Referencias relacionadas:
  • PMID:15983376
  • PMID:16185088
  • PMID:16267050
  • PMID:16627869
  • PMID:17194708
• Tanto la histona H3.1 como la H3.1t se localizan en el núcleo y el cromosoma, lo cual es consistente con sus funciones en la estructura y función de la cromatina.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno fue un péptido sintético que contenía la Lisina36 dimetilada de la histona H3 humana, diseñado para conferir una alta especificidad para esta modificación. Para aplicaciones críticas, considere verificar la especificidad mediante ensayos de competencia con péptidos o análisis de Western blot de extractos de histonas con estados de metilación conocidos.
• En Western blot (WB), se espera una banda a aproximadamente 15 kDa. Optimice la dilución del anticuerpo y valídelo en el sistema de muestra relevante, utilizando controles de carga apropiados.
• Para inmunoprecipitación de cromatina (ChIP y ChIP-seq), confirme el enriquecimiento de H3K36 dimetilada en los cuerpos de los genes transcritos activamente u otros objetivos genómicos establecidos. Incluya loci de control positivo y negativo adecuados para garantizar un rendimiento de grado ChIP.
• En inmunohistoquímica (IHC-P) e inmunofluorescencia (IF/ICC), los métodos de fijación y recuperación de antígenos pueden afectar la accesibilidad del epítopo; considere probar diferentes condiciones para lograr una señal óptima.

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