Anticuerpo monoclonal de conejo para DiMetil-Histona H3-K4 (Q16695/P68431) para investigación en ChIP, WB y epigenética

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la Histona H3 (Dimetil-K4)

• La histona H3 es un componente central del nucleosoma, la unidad básica de la cromatina. Junto con las histonas H2A, H2B y H4, empaqueta el ADN, regulando el acceso para la transcripción, replicación, reparación y la estabilidad cromosómica.
  Referencias relacionadas: UniProt Q16695, UniProt P68431

• La histona H3 se localiza en el núcleo y los cromosomas.
  Referencias relacionadas: UniProt Q16695, UniProt P68431

• Existen múltiples variantes de la histona H3. La variante H3.1 dependiente de la replicación (codificada por ejemplo por los genes H3C1–H3C12) se expresa de forma generalizada, mientras que la variante H3.1t (H3-4/HIST3H3) presenta una expresión específica de testículo, lo que indica un rol especializado en la organización de la cromatina durante la espermatogénesis.
  Referencias relacionadas: UniProt Q16695

• La cola N-terminal de la histona H3 está sujeta a extensas modificaciones postraduccionales (MPT), que incluyen metilación, acetilación, fosforilación, citrulinación y más. Estas modificaciones forman un "código de histonas" que influye en la arquitectura de la cromatina y la actividad génica.
  Referencias relacionadas: UniProt Q16695, UniProt P68431

• La dimetilación en la lisina 4 (H3K4me2) es una marca epigenética bien caracterizada asociada a promotores génicos activos y en reposo, así como a regiones potenciadoras. Este anticuerpo monoclonal de conejo se obtuvo a partir de un péptido K4 dimetilado sintético y permite la detección específica de H3K4me2 en diversos ensayos.

Orientación experimental y consejos técnicos

• Considere validar la especificidad para la dimetil-K4 mediante ensayos de competición con péptidos o comparando las señales con anticuerpos dirigidos a otras modificaciones de H3.
• Para ChIP, ChIP-seq y CUT&Tag, optimice la reticulación, la fragmentación de la cromatina y la cantidad de anticuerpo para su tipo de célula o tejido particular.
• La amplia reactividad cruzada pronosticada (Humano, Ratón, Rata, Otros) sugiere un epitopo conservado; sin embargo, confirme la reactividad en su especie de interés antes de realizar estudios a gran escala.
• Utilice inhibidores de proteasas y fosfatasas durante la extracción de muestras para preservar las modificaciones lábiles de las histonas.
• El peso molecular calculado de la histona H3 es de aproximadamente 15 kDa; ajuste el porcentaje del gel y las condiciones de transferencia correspondientemente para la transferencia Western.

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