Anticuerpo Policlonal de Conejo DiMetil-Histona H3-K9 (Q16695/P68431) para Investigación Epigenética | WB, ChIP, IF/ICC

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Histona H3

La histona H3 es un componente central del nucleosoma, que envuelve y compacta el ADN en cromatina, regulando así la accesibilidad del ADN para procesos como la transcripción, la reparación del ADN, la replicación y la estabilidad cromosómica. La modificación post-traduccional dinámica de las histonas, que incluye metilación, acetilación y fosforilación, constituye el "código de histonas" que gobierna la estructura y función de la cromatina.

La metilación en la lisina 9 de la histona H3 (H3K9; correspondiente a la posición 10 en la entrada UniProt P68431 al incluir la metionina iniciadora) es una marca epigenética crítica. La dimetilación en este sitio (H3K9me2) es catalizada por varias metiltransferasas y generalmente se asocia con la represión transcripcional y la formación de heterocromatina. Tanto la histona H3.1 canónica (P68431) como la variante específica de testículo H3.1t (Q16695) contienen este residuo de lisina, que está sujeto a múltiples tipos de modificaciones, incluyendo di- y tri-metilación. Referencias relacionadas: PMID:11242053, PMID:16185088, PMID:16267050

La histona H3 se localiza principalmente en el núcleo y es un componente estructural de los cromosomas. Mientras que H3.1 se expresa ubicuamente en células que se replican, H3.1t exhibe especificidad tisular y se encuentra predominantemente en células testiculares, reflejando su papel en la organización de la cromatina durante la espermatogénesis. Referencias relacionadas: PMID:16567635

El plegamiento tipo inmunoglobulina de la histona H3, junto con otras histonas centrales, facilita la formación de la partícula central del nucleosoma, proporcionando una plataforma estable para el ensamblaje de cromatina de orden superior. Los patrones de modificación post-traduccional en H3, incluyendo la dimetilación en K9, se regulan dinámicamente durante el ciclo celular y el desarrollo, influyendo en los perfiles de expresión génica.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético que cubre los aminoácidos 1-100 de la histona H3 humana. Al utilizar el anticuerpo en aplicaciones como la transferencia Western (WB) o la inmunohistoquímica (IHC), considere verificar la especificidad con ensayos de competencia por péptidos o utilizando muestras de control positivas y negativas bien caracterizadas.
• Para la inmunoprecipitación de cromatina (ChIP) y ChIP-seq, la reactividad del anticuerpo con la H3K9 dimetilada (H3K9me2) puede aprovecharse para mapear dominios de cromatina represiva. Asegúrese de que las condiciones de entrecruzamiento y sonicación se optimicen para su tipo celular.
• En WB, el peso molecular esperado de la histona H3 es de aproximadamente 15 kDa. Debe observarse una banda clara a este tamaño; las bandas adicionales pueden indicar una unión no específica, por lo que se recomienda la optimización de la dilución.
• Se predice que este anticuerpo tiene una amplia reactividad cruzada basándose en la conservación de la secuencia, pero recomendamos validar la reactividad en su especie específica y tipo de muestra, especialmente para organismos no mamíferos.

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