pAb de conejo anti-histona H4-K20 dimetilada (P62805) para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la histona H4

• La histona H4 es un componente central del nucleosoma que envuelve y compacta el ADN en cromatina, lo que limita la accesibilidad del ADN para la transcripción, la reparación del ADN, la replicación del ADN y la estabilidad cromosómica.
• Desempeña un papel central en el código de histonas, donde las extensas modificaciones postraduccionales (PTM) en residuos específicos regulan la dinámica de la cromatina. Las modificaciones incluyen acetilación, metilación, fosforilación, citrulinación y ubiquitinación.
• La dimetilación de la lisina 20 (H4K20me2) es una marca epigenética bien conservada asociada con la formación de heterocromatina constitutiva, el silenciamiento transcripcional, la replicación del ADN y la respuesta al daño del ADN.
• La histona H4 se localiza en el núcleo y los cromosomas. Referencias relacionadas: PMID:12086618, PMID:15964846

Guía experimental y consejos técnicos

• El anticuerpo se generó contra un péptido dimetilado sintético que abarca la lisina 20 de la histona H4 humana, lo que proporciona un reconocimiento específico de la modificación H4K20me2.
• Para Western blotting (WB), el peso molecular esperado es de aproximadamente 11 kDa; incluya marcadores de peso molecular adecuados y considere el uso de extractos nucleares para la detección enriquecida del objetivo.
• En inmunohistoquímica (IHC-P) e inmunofluorescencia (IF/ICC), los pasos de permeabilización y las condiciones de recuperación de antígeno pueden influir en la tinción; valide el anticuerpo en su sistema celular o tisular específico junto con controles de estado de metilación.
• Para ELISA, considere usar un ensayo de competición de péptidos para confirmar la especificidad de la modificación y optimizar las concentraciones de recubrimiento.
• Dado que se trata de un anticuerpo policlonal, se debe verificar la consistencia entre lotes para aplicaciones cuantitativas críticas.
• La reactividad cruzada es amplia, pero las variaciones de secuencia específicas de la especie en el epítopo pueden afectar la señal; valide en el organismo modelo correspondiente.

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