eEF2 mAb de conejo - P13639

Especificaciones y parámetros principales del producto

Información biológica: Función y localización de eEF2

• Cataliza el paso de translocación ribosomal dependiente de GTP durante la elongación de la traducción. Durante este paso, el ribosoma cambia del estado pre-translocacional (PRE) al post-translocacional (POST), ya que el peptidil-ARNt recién formado unido al sitio A y el ARNt desacilado unido al sitio P se trasladan a los sitios P y E, respectivamente; este proceso se acompaña del movimiento del ARNm y cambios conformacionales en el ribosoma. Referencias relacionadas: PMID:26593721
• eEF2 es una proteína de unión a GTP de 95 kDa altamente conservada que pertenece a la familia del factor de elongación G, esencial para la biosíntesis de proteínas.
• Se localiza principalmente en el citoplasma, donde ejerce su función canónica, pero también se detecta en el núcleo, lo que sugiere roles adicionales fuera de la elongación de la traducción.
• Modificaciones postraduccionales, como la fosforilación, acetilación, ADP-ribosilación, metilación y conjugación con ubiquitina, regulan la actividad y estabilidad de eEF2 en respuesta a señales celulares.
• Las mutaciones en el gen EEF2 causan ataxia espinocerebelosa tipo 26 (SCA26), un trastorno neurodegenerativo caracterizado por incoordinación motora progresiva.
• Estudios estructurales revelan dominios de unión a nucleótidos conservados y conformaciones dinámicas esenciales para la unión al ribosoma y la translocación.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno está dirigido contra la región C-terminal (aa 759-858), lo que puede facilitar la detección de eEF2 de longitud completa y productos de escisión potenciales; verifique el tamaño de la banda en aproximadamente 95 kDa en lisados representativos.
• Para transferencia Western, utilice un gel de SDS-PAGE estándar (por ejemplo, 8-10%) y una membrana de PVDF o nitrocelulosa; considere optimizar las condiciones de bloqueo (por ejemplo, 5% de leche desnatada o BSA) para reducir el fondo.
• En IHC-P e IF/ICC, puede ser necesaria la recuperación de antígeno (buffer de citrato o EDTA) y la permeabilización; pruebe protocolos de fijación (formol vs metanol) para equilibrar la preservación de la morfología y la accesibilidad al epítopo.
• El rendimiento en ELISA depende del formato de ensayo; como anticuerpo monoclonal, puede funcionar como reactivo de detección o captura; valide la linealidad y sensibilidad utilizando eEF2 recombinante o lisados celulares.
• La reactividad cruzada con ratón y rata permite la investigación en organismos modelo comunes; confirme la especificidad mediante controles de silenciamiento por siARN o knockout en su sistema experimental.

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