Anticuerpo policlonal de conejo contra el receptor de EGF (específico de E746-A750del) para WB, ELISA - P00533

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización del receptor de EGF (EGFR)

• EGFR es una tirosina cinasa receptora que se une a múltiples ligandos de la familia de EGF (p. ej., EGF, TGFA, AREG, epigen, BTC, EREG, HBEGF). La unión del ligando desencadena la homo- o heterodimerización, la autofosforilación y la activación de vías de señalización posteriores, incluidas RAS-RAF-MEK-ERK, PI3K-AKT, PLCgamma-PKC, STAT y NF-kappa-B. Este anticuerpo es específico de la mutación con deleción E746-A750, que se encuentra comúnmente en el cáncer de pulmón de células no pequeñas. Referencias relacionadas: PMID:10805725 PMID:27153536 PMID:2790960 PMID:12297049 PMID:15611079 PMID:17909029 PMID:11116146 PMID:11602604 PMID:11483589 PMID:20462955
• La isoforma 2 de EGFR puede actuar como antagonista de la acción de EGF, mientras que la isoforma canónica 1 es el receptor de señalización predominante.
• EGFR se localiza en la membrana celular, pero también está presente en el retículo endoplasmático, el aparato de Golgi, el núcleo y los endosomas, y puede secretarse.
• La proteína experimenta una amplia variedad de modificaciones postraduccionales, incluidas fosforilación, glicosilación, hidroxilación, palmitoilación, metilación y ubiquitinación, que regulan su actividad y tráfico.
• Se expresa ubicuamente, y la isoforma 2 también se encuentra en cánceres de ovario.
• EGFR también actúa como receptor de la célula huésped para la entrada del virus de la hepatitis C (HCV), mediando la formación del complejo CD81-CLDN1 y la fusión de membranas.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es una proteína recombinante que incluye la deleción E746-A750, lo que indica que el anticuerpo está diseñado para reconocer selectivamente el epítopo mutante. Los investigadores deben confirmar la especificidad utilizando células que expresen EGFR de tipo silvestre como control negativo.
• Para el análisis mediante Western blot, se recomienda considerar lisados proteicos de líneas celulares humanas de cáncer conocidas por albergar la mutación EGFR E746-A750del (p. ej., HCC827, H1975) o proteína recombinante EGFR mutante.
• Para ELISA, se recomienda recubrir con proteína EGFR recombinante E746-A750del. Debe tenerse en cuenta que puede producirse reactividad cruzada con EGFR de tipo silvestre; son necesarios un bloqueo adecuado y la optimización de la dilución.
• Las concentraciones de trabajo óptimas para WB y ELISA deben determinarse empíricamente; las diluciones iniciales habituales para anticuerpos policlonales oscilan entre 1:500 y 1:2000.

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