EGFR pAb de conejo para WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P00533

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización del EGFR

• EGFR es un receptor tirosina cinasa que se une a ligandos de la familia EGF (p. ej., EGF, TGFA, AREG, BTC, epiregulina, HBEGF) para regular la proliferación, supervivencia y diferenciación celular. Referencias relacionadas: PMID:10805725, PMID:27153536, PMID:2790960
• La unión del ligando induce la dimerización del receptor y la autofosforilación, activando cascadas descendientes que incluyen las vías RAS-RAF-MEK-ERK, PI3K/AKT, PLCγ/PKC, STATs y NF-κB. Referencias relacionadas: PMID:27153536, PMID:11116146
• EGFR también fosforila sustratos no receptores como RGS16 (modulando la señalización de proteínas G) y MUC1 (mejorando las interacciones SRC/β-catenina). Referencias relacionadas: PMID:11602604, PMID:11483589
• El receptor se localiza predominantemente en la membrana celular, pero sufre tráfico hacia endosomas, el aparato de Golgi, el retículo endoplasmático y el núcleo, permitiendo una señalización regulada espacialmente.
• Múltiples modificaciones postraduccionales (fosforilación, ubiquitinación, hidroxilación, metilación, palmitoilación) ajustan finamente la actividad, estabilidad y distribución subcelular del EGFR.
• Se expresa de forma ubicua en tejidos normales; el isoforma 2 con empalme alternativo se detecta notablemente en cánceres de ovario y puede funcionar como un antagonista del EGF.
• Además de los ligandos endógenos, EGFR sirve como receptor hué para la entrada del virus de la hepatitis C (VHC), facilitando la internalización viral.
• Reconocido como un protooncogén, la disregulación del EGFR (sobreexpresión o mutaciones activadoras) impulsa numerosos cánceres, posicionándolo como un objetivo terapéutico central.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno (aa 1021–1210) se encuentra dentro del dominio citoplasmático, el cual se conserva en condiciones desnaturalizantes comunes; considere el uso de lisis RIPA estándar y SDS-PAGE reductor para Western blot con líneas celulares positivas (p. ej., A431, HeLa) y negativas apropiadas.
• Para IHC-P, los protocolos de recuperación de antígenos (p. ej., tampón de citrato pH 6,0 o Tris-EDTA pH 9,0) pueden requerir optimización, ya que EGFR es una glucoproteína transmembrana a menudo muy N-glicosilada.
• Aunque se informa reactividad cruzada para humano, ratón y rata, recomendamos verificar la reactividad específica de la especie y la especificidad de la señal en su sistema experimental, particularmente al usar modelos genéticamente modificados.
• Debido al alto peso molecular (~134 kDa), use geles de SDS-PAGE al 8% o en gradiente y optimice las condiciones de transferencia (p. ej., transferencia húmeda durante la noche o semiseca con bajo metanol) para Western blot.
• En experimentos de inmunoprecipitación (IP), la preclearing de los lisados y el uso de un control de isotipo IgG de conejo pueden ayudar a reducir la unión inespecífica.
• Al desarrollar un ELISA, emparejar este anticuerpo policlonal con un anticuerpo de captura monoclonal puede mejorar la sensibilidad del ensayo; realice titulaciones en tablero de ajedrez para determinar las concentraciones óptimas.

CamelBio: Su puente de abastecimiento integral

CamelBio sirve como un socio de abastecimiento integral para fabricantes de diagnóstico y laboratorios de investigación, proporcionando materias primas para IVD confiables que abarcan anticuerpos, antígenos y reactivos auxiliares. Este EGFR pAb de conejo apoya la investigación de oncología y transducción de señales, y lo complementamos con pares de anticuerpos validados, anticuerpos monoclonales/policlonales optimizados, reactivos a granel y abastecimiento personalizado para objetivos raros y difíciles. Desde el concepto hasta la clínica, CamelBio agiliza su flujo de trabajo de procurement para acelerar el desarrollo de diagnóstico.