pAb de conejo anti-eIF5A para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P63241

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de eIF5A

• eIF5A (Factor 5A-1 de iniciación de la traducción eucariota) es un factor de traducción altamente conservado que promueve la elongación y terminación, rescatando ribosomas detenidos en poliprolina u otros motivos. Referencias relacionadas: PMID:33547280
• Se une entre los sitios E y P del ribosoma, facilitando la transferencia de peptidilo durante el paso de elongación de colas CAT como cofactor del control de calidad de ribosomas (RQC).
• eIF5A participa en la dinámica de actina, la progresión del ciclo celular y la degradación de ARNm, y contribuye a la respuesta al estrés y el mantenimiento de la integridad de la pared celular. Referencias relacionadas: PMID:16987817
• En complejo con la sintenina SDCBP, regula la apoptosis dependiente de p53/TP53 y modula la apoptosis mediada por TNF. Referencias relacionadas: PMID:15371445 PMID:15452064 PMID:17187778
• eIF5A media los efectos de las poliaminas en la extensión de procesos neuronales y la supervivencia, y es necesario para la autofagia al aumentar la traducción de ATG3 en un motivo específico ASP-ASP-Glicina, promoviendo la lipidación de LC3B. Referencias relacionadas: PMID:17360499 PMID:29712776
• Como cofactor celular de las proteínas Rex del HTLV-1 y Rev del VIH-1, eIF5A es esencial para la exportación nuclear de ARNm virales no empalmados o parcialmente empalmados.
• La proteína se localiza en el citoplasma, el núcleo y la membrana del retículo endoplásmico, y está sujeta a modificaciones postraduccionales que incluyen la acetilación y la hipusinación (formación de hipusina en Lys-50). Se expresa en células endoteliales de vena umbilical y en diversas líneas celulares cancerosas.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a la proteína eIF5A humana de longitud completa (aa 1-154), por lo que puede detectar tanto la forma precursora como la madura (hipusinada). La hipusinación de Lys-50 agrega ~113 Da, lo que puede causar un ligero desplazamiento en SDS-PAGE; si necesita discriminar ambas formas, considere usar muestras recién preparadas y sistemas de gel adecuados.
• Para Western blotting, el peso molecular predicho es de ~17 kDa; asegure condiciones de transferencia adecuadas para proteínas de bajo peso molecular.
• eIF5A está filogenéticamente conservado; se ha confirmado la reactividad cruzada con ratón, mientras que otras especies deben validarse experimentalmente.
• En inmunofluorescencia o inmunohistoquímica, eIF5A puede mostrar tinción tanto citoplasmática como nuclear dependiendo del tipo celular y la fijación; optimice la permeabilización y valide en el sistema de muestra correspondiente.
• ELISA y otros inmunoensayos pueden requerir titulación; se recomienda incluir controles positivos (por ejemplo, lisados de HeLa, Jurkat) y negativos.

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