Anticuerpo monoclonal de conejo anti-ESRα para WB - P03372

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización del Receptor de Estrógeno

• El receptor de estrógeno alfa (ERα), también conocido como ER-alfa, receptor de estradiol y receptor nuclear subfamilia 3 grupo A miembro 1 (NR3A1), está codificado por el gen ESR1 y pertenece a la superfamilia de receptores nucleares de hormonas.
• El empalme alternativo genera múltiples isoformas, algunas carentes de dominios funcionales, que pueden modular la actividad transcripcional del receptor de longitud completa mediante la unión competitiva de ligando o ADN y la heterodimerización. Referencias relacionadas: PMID:10970861
• Tras unirse al 17β-estradiol, ERα sufre un cambio conformacional que promueve la homodimerización y la unión directa a elementos de respuesta a estrógenos (ERE) en los promotores de genes diana, o se asocia con otros factores de transcripción (p. ej., AP-1, Sp1, NF-κB) para regular la transcripción independiente de ERE.
• ERα también media la señalización rápida de estrógenos iniciada en la membrana, activando varias cascadas de quinasas, y es esencial para la regulación transcripcional mediada por MTA1 de BRCA1 y BCAS3. Referencias relacionadas: PMID:17922032
• Participa en la activación de NOS3 y la producción de óxido nítrico endotelial, contribuyendo a la homeostasis vascular. Referencias relacionadas: PMID:21937726
• Se localiza predominantemente en el núcleo, pero también se encuentra en el citoplasma, la membrana celular y el aparato de Golgi; su distribución subcelular está regulada dinámicamente por la unión de ligando y modificaciones postraduccionales.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen fosforilación, palmitoilación, metilación, ubiquitinación y glicosilación, que influyen en la estabilidad, localización y actividad transcripcional del receptor.
• Se expresa ampliamente en muchos tejidos, pero notablemente ausente en la glándula pituitaria. Referencias relacionadas: PMID:10970861

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a los residuos 495–595 en la región C-terminal de ESRα humano. Esta región puede estar presente en múltiples isoformas, pero considere verificar la especificidad de la isoforma utilizando líneas celulares que expresen variantes de empalme distintas.
• Para Western blot (WB), el peso molecular predicho es de 66 kDa; utilice marcadores pre-teñidos para confirmar el tamaño y optimice las condiciones de bloqueo para reducir la unión inespecífica.
• Al realizar inmunoprecipitación (IP), prepare lisados frescos con inhibidores apropiados de proteasas y fosfatasas para mantener la estabilidad de ERα.
• Para inmunoprecipitación de cromatina (ChIP), optimice cuidadosamente los parámetros de entrecruzamiento y sonicación, ya que las interacciones de ERα con la cromatina pueden ser transitorias y dependientes de la estimulación con ligando.
• En citometría de flujo (tinción intracelular), incluya un control isotipo y valide los protocolos de permeabilización adecuados para antígenos nucleares.
• Para ELISA, valore el anticuerpo como reactivo de captura o detección contra la proteína recombinante ERα para establecer concentraciones de trabajo óptimas.
• Todas las aplicaciones han sido validadas con muestras humanas; la reactividad con otras especies debe confirmarse experimentalmente.

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