Anticuerpo monoclonal de conejo anti-CD45 humano/de mono conjugado con FITC para FC - P08575

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de CD45

• CD45, también conocido como PTPRC, es una proteína tirosina-fosfatasa de tipo receptor que actúa como el antígeno leucocitario común (L-CA o T200). Funciona como regulador positivo de la activación de las células T a través del receptor de antígeno tras unirse a DPP4, y es necesario para una coactivación eficaz de las células T. Referencias relacionadas: PMID:35767951
• La región intracelular alberga dos dominios fosfatasa: el primer dominio posee actividad enzimática, mientras que el segundo modula la especificidad por el sustrato. CD45 desfosforila intermediarios clave de la señalización, como SKAP1, FYN y LYN, ajustando así con precisión los umbrales de señalización del receptor de las células T.
• El corte y empalme alternativo genera múltiples isoformas (1–8) con dominios extracelulares variables. En los timocitos se detectan las isoformas 1, 2, 3, 5 y 7, mientras que las isoformas 4, 6 y 8 están ausentes, lo que indica una expresión de isoformas estrechamente regulada durante el desarrollo de las células T.
• La localización subcelular incluye la membrana celular, las balsas de membrana y la sinapsis inmunológica, donde CD45 interactúa dinámicamente con las células presentadoras de antígeno para modular la activación de las células T y limitar la autorreactividad.
• Como proteína altamente glucosilada y fosforilada, CD45 presenta un intervalo de peso molecular aparente de 131–147 kDa en SDS-PAGE, lo que refleja extensas modificaciones postraduccionales que influyen en su función y diversidad de isoformas.
• CD45 también participa en las interacciones entre el huésped y los patógenos: actúa como receptor de la proteína UL11 del citomegalovirus humano, lo que provoca una alteración de la proliferación de las células T tras la interacción viral.

Orientación experimental y consejos técnicos

• Para la citometría de flujo, titule el anticuerpo para determinar la concentración óptima para su tipo celular específico y la configuración de su instrumento.
• Utilice PBMC humanas o suspensiones de linfocitos de macaco cangrejero como controles positivos; CD45 se expresa en gran medida en todos los subgrupos de leucocitos, lo que proporciona un marcador de compuerta robusto.
• Incorpore este conjugado con FITC en paneles multicolor junto con marcadores para células T, células B y células mieloides, con el fin de permitir una inmunofenotipificación exhaustiva.
• Asegúrese de que el citómetro esté equipado con un láser de 488 nm y filtros adecuados para la detección de FITC.
• Valide la tinción con un control de isotipo adecuado e incluya un bloqueo de los receptores Fc para minimizar la unión inespecífica.
• Tenga en cuenta que el epítopo se localiza en el dominio extracelular (aa 26–577), compartido por múltiples isoformas de CD45, lo que permite un reconocimiento amplio de los leucocitos.

CamelBio: su puente integral de abastecimiento

CamelBio es su socio integral especializado en materias primas para IVD y ofrece pares de anticuerpos validados, anticuerpos monoclonales/policlonales, reactivos auxiliares a granel y adquisición de dianas poco comunes para acelerar el desarrollo de ensayos basados en CD45. Nuestras completas capacidades de abastecimiento cubren toda la cadena, desde el concepto hasta la clínica, proporcionando a fabricantes de diagnósticos, laboratorios e institutos de investigación reactivos fiables para la detección de marcadores leucocitarios y el estudio de las células inmunitarias.