Anticuerpo monoclonal FITC conejo anti-ratón CD32 para citometría de flujo - P08101

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización del receptor II de la región Fc de inmunoglobulina gamma de baja afinidad (CD32)

• Codificado por el gen Fcgr2b, el receptor IIB de Fc gamma (CD32) es un receptor de baja afinidad para la región Fc de IgG complejada, que existe en múltiples isoformas (IIB1, IIB1', IIB2 y una IIB3 secretada) generadas por empalme alternativo.
• Sus funciones principales incluyen la fagocitosis de complejos inmunitarios, la modulación de la producción de anticuerpos por las células B y la regulación a la baja de la activación de células B, células T y mastocitos tras la coactivación con los receptores de antígeno.
• La isoforma IIB2 media la endocitosis de complejos inmunitarios solubles a través de hoyos revestidos de clatrina, mientras que IIB1 y IIB1' forman cápsulas pero no se internalizan.
• El receptor se expresa ampliamente en células de origen hematopoyético: IIB1 se encuentra de forma preferente en el linaje linfoide, IIB2 en el linaje mieloide y IIB3 es secretado por macrófagos al suero.
• La localización subcelular incluye la membrana celular, los compartimentos citoplasmáticos/ citoesqueleticos y, para la isoforma IIB3, la secreción.
• Las características postraduccionales incluyen enlaces disulfuro, glicosilación y fosforilación (foproteína), lo cual coincide con su arquitectura de dominio de inmunoglobulina.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a la región extracelular (aa 30–207), lo que sugiere que el anticuerpo probablemente reconoce el dominio de unión al ligando común a las isoformas principales; sin embargo, la detección específica de isoformas debe validarse en el sistema de muestra correspondiente.
• Para citometría de flujo, titule el anticuerpo conjugado con FITC en una línea celular conocida que exprese CD32 (por ejemplo, esplenocitos de ratón o una línea de macrófagos) para determinar la concentración óptima de tinción y minimizar la unión no específica.
• Incluya controles de isotipo adecuados y pasos de bloqueo del receptor Fc para garantizar la especificidad al analizar células hematopoyéticas frescas.
• Tenga en cuenta que el peso molecular observado puede variar (31–36 kDa) dependiendo de la glicosilación y la isoforma; confirme la detección por transferencia Western si necesita validación entre aplicaciones.

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