Anticuerpo Monoclonal de Conejo Formil-Histona H2B-K120 (P62807/Q16778) para WB, IHC-P, ELISA

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Formil-Histona H2B

La histona H2B es un componente central del nucleosoma, donde envuelve y compacta el ADN en cromatina, desempeñando así un papel fundamental en la regulación de la transcripción, la reparación del ADN, la replicación del ADN y la estabilidad cromosómica. La accesibilidad dinámica del ADN se rige por el "código de histonas", un conjunto complejo de modificaciones postraduccionales (PTM) en las histonas. Referencias relacionadas: UniProt P62807, UniProt Q16778

La histona H2B humana sufre extensas PTM, incluyendo acetilación (p. ej., en K6, K12, K16, K21), crotonilación (K12), fosforilación (S15) y formilación en K120. La formilación en K120 es una modificación emergente que puede influir sutilmente en la arquitectura de la cromatina y la expresión génica, aunque su plena importancia biológica sigue bajo investigación activa. Referencias relacionadas: PMID:16283522, PMID:16627869, PMID:21925322, PMID:12757711

Además de su papel estructural, la H2B exhibe una amplia actividad antibacteriana y puede contribuir a la barrera antimicrobiana del epitelio colónico y a la actividad bactericida del líquido amniótico. Referencias relacionadas: UniProt P62807, UniProt Q16778

La H2B se localiza predominantemente en el núcleo y se asocia con los cromosomas. El genoma humano codifica múltiples variantes de H2B, incluyendo la H2B tipo 1-C/E/F/G/I (P62807) y la H2B tipo 2-E (Q16778), que comparten secuencias altamente conservadas. El péptido inmunógeno abarca una región conservada en estos isoformas, lo que respalda la amplia reactividad cruzada prevista. Referencias relacionadas: UniProt P62807, UniProt Q16778

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético correspondiente a la histona H2B humana con formilación en la lisina 120. Se espera que el anticuerpo reconozca específicamente la formil-H2B-K120; considere el uso de un péptido no formilado o una desformilación enzimática como control negativo para confirmar la especificidad.
• Para Western blotting (WB), se espera una banda a aproximadamente 14 kDa. Utilice extractos nucleares o preparaciones enriquecidas en histonas. Se recomienda la inclusión de un marcador de bajo peso molecular y una muestra de control (p. ej., sin tratar vs. tratado con inhibidor de formilasa).
• Para inmunohistoquímica (IHC-P), puede ser necesaria la recuperación de antígeno para exponer el epítopo nuclear en secciones fijadas en formol e incluidas en parafina. Debe observarse tinción nuclear; valide con controles de tejido apropiados.
• Para ELISA, recubra con el péptido formilado y use un péptido no modificado como control para evaluar la especificidad de unión. Optimice las condiciones de recubrimiento y la dilución del anticuerpo según la matriz de la muestra.
• Debido a la alta identidad de secuencia, se prevé que el anticuerpo presente reactividad cruzada con la H2B humana, de ratón y de rata; sin embargo, se aconseja la validación en la especie y el sistema de muestra relevantes.
• Evite agentes de bloqueo inespecíficos que puedan enmascarar la modificación de moléculas pequeñas; se pueden considerar bloqueadores sin BSA o estrategias de bloqueo alternativas si se observa ruido de fondo.

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