Anticuerpo Monoclonal de Conejo GRB2 para WB - P62993

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de GRB2

• GRB2 es una proteína adaptadora no enzimática que sirve como enlace crítico en cascadas de señalización desde receptores de superficie celular hasta respuestas celulares posteriores, incluyendo expresión génica y varios procesos biológicos como inmunidad innata y adaptativa, autofagia, reparación del ADN y necroptosis. Referencias relacionadas: PMID:11016927, PMID:11726515, PMID:37626338
• En células T, GRB2 se une a LAT fosforilado tras la activación del TCR, reclutando SOS1 para activar la vía KRAS/RAF1/MAPK, regulando así la activación, diferenciación y función de las células T. Referencias relacionadas: PMID:9489702, PMID:12171928, PMID:25870599, PMID:36864087
• De manera similar, en células B, GRB2 amplifica la movilización de Ca2+ y la activación de la quinasa MAP ERK tras ser reclutado al BCR fosforilado. Referencias relacionadas: PMID:25413232, PMID:29523808
• GRB2 regula el cambio entre autofagia y necrosis programada al interactuar con componentes del necrosoma (p. ej., RIPK1) y reguladores de la autofagia (p. ej., SQSTM1, BECN1). Referencias relacionadas: PMID:35831301, PMID:38182563
• Modula la biogénesis de miRNA mediante la formación de un complejo ternario con AGO2 y DICER1. Referencias relacionadas: PMID:37328606
• GRB2 participa en la respuesta al estrés de replicación y en la reparación dirigida por homología (HDR) estabilizando RAD51 en las horquillas detenidas y regulando el reclutamiento de MRE11. Referencias relacionadas: PMID:34348893, PMID:38459011
• Una isoforma que ocurre naturalmente (Grb3-3) carece de la función del dominio SH2 y actúa como dominante negativo, inhibiendo la señalización RAS-ERK y la proliferación celular al competir con GRB2 por la unión a SOS1. Referencias relacionadas: PMID:36171279
• GRB2 se localiza principalmente en el citoplasma pero también se encuentra en el núcleo, endosomas y aparato de Golgi, consistente con sus funciones en el tráfico de señales.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen fosforilación, acetilación y ubiquitinación (enlace isopeptídico), y alberga dominios SH2 y SH3 que median interacciones con proteínas que contienen fosfotirosina y motivos ricos en prolina.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno abarca el dominio SH3 del extremo C-terminal y la región adyacente, que puede reconocer GRB2 de longitud completa y sus isoformas; verifique la reactividad en su sistema modelo.
• Para Western blot, GRB2 típicamente migra a ~25 kDa; utilice controles de carga apropiados y valide la especificidad de la banda en muestras de knockdown o knockout.
• En inmunoprecipitación, considere usar un protocolo de reticulación o un anticuerpo secundario específico de cadena ligera para evitar la interferencia de la cadena ligera de IgG de ~25 kDa.
• Para inmunohistoquímica e inmunofluorescencia, se recomienda optimizar los pasos de recuperación antigénica y bloqueo para cada tipo de tejido.
• La reactividad cruzada del anticuerpo con GRB2 de ratón y rata permite estudios entre especies, pero confirme con controles positivos y negativos específicos de especie.

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