mAb de conejo anti-HDAC8 para IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - Q9BY41

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de HDAC8

• Histona desacetilasa 8 (HDAC8), también conocida como HDACL1, es un miembro de la familia de histonas desacetilasas de clase I que cataliza la eliminación de grupos acetilo de los residuos de lisina en las colas N-terminales de las histonas centrales (H2A, H2B, H3, H4), lo que conduce a la compactación de la cromatina y a la represión transcripcional. Esta actividad es fundamental para la regulación epigenética de la expresión génica, la progresión del ciclo celular y los procesos de desarrollo. Referencias relacionadas: PMID:10748112 • PMID:10922473 • PMID:10926844
• HDAC8 funciona dentro de grandes complejos multiproteicos para ejercer su actividad desacetilasa y, además, desacetila la subunidad SMC3 de la cohesina, regulando así la liberación de los complejos de cohesina de la cromatina durante la mitosis. Referencias relacionadas: PMID:22885700
• Más allá de su función desacetilasa, HDAC8 posee actividad proteína decrotonilasa, catalizando la eliminación de grupos crotonilo ((2E)-butenoilo) de las histonas, lo que amplía su papel en la modificación epigenética. Referencias relacionadas: PMID:28497810
• La proteína puede contribuir a la contractilidad de las células del músculo liso, lo que indica un papel regulador no relacionado con las histonas. Referencias relacionadas: PMID:15772115
• HDAC8 se localiza predominantemente en el núcleo y los cromosomas, pero también puede detectarse en el citoplasma, lo que sugiere un transporte subcelular dinámico.
• La expresión tisular está generalizada pero en niveles bajos; se observa una mayor expresión en corazón, cerebro, riñón, páncreas, hígado, pulmón, placenta y próstata.
• La proteína está sujeta a fosforilación y empalme alternativo (splicing), y las mutaciones en HDAC8 se asocian con enfermedades como el síndrome de Cornelia de Lange y la discapacidad intelectual, lo que destaca su importancia clínica.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno (un péptido sintético que abarca los aminoácidos 1–100 de la HDAC8 humana) se dirige a la región N-terminal; considere verificar la especificidad del anticuerpo mediante experimentos de bloqueo con péptidos o de eliminación (knockdown).
• Para IHC-P, realice la recuperación de antígeno utilizando métodos mediados por calor (por ejemplo, tampón citrato, pH 6.0) y pruebe con tejidos que se sabe que expresan HDAC8, como el corazón o el cerebro.
• En IF/ICC, asegure una permeabilización adecuada (por ejemplo, Triton X-100 al 0.1%) y utilice una tinción nuclear de contraste para confirmar la localización nuclear esperada.
• Para IP, optimice las proporciones de anticuerpo a lisado y valide los socios co-inmunoprecipitados en su línea celular de interés.
• El ELISA puede requerir una titulación cuidadosa tanto de los anticuerpos de captura como de detección; incluya un pocillo de control negativo para evaluar el fondo.
• La reactividad cruzada con ratón y rata se predice en función de la homología de secuencia, pero es aconsejable una validación independiente en estas especies antes de realizar estudios a gran escala.

CamelBio: Su puente de abastecimiento integral

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