mAb de conejo contra la IgE humana para WB, FC, ELISA - P01854

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de la IgE

• La IgE es una región constante épsilon de la cadena pesada de las inmunoglobulinas que define el isotipo IgE. Es una glucoproteína con enlaces disulfuro intra e intercatenarios.
• La especificidad de unión al antígeno de la IgE está determinada por los dominios variables generados mediante la recombinación V(D)J y la hipermutación somática, lo que permite un reconocimiento de alta afinidad. Referencias relacionadas: PMID:17576170, PMID:20176268
• La IgE secretada media las respuestas alérgicas y antiparasitarias mediante su unión al receptor de alta afinidad FCER1A en mastocitos, basófilos y eosinófilos, desencadenando la desgranulación y la liberación de histamina, leucotrienos y citocinas. Referencias relacionadas: PMID:25629393, PMID:33840121, PMID:8114916, PMID:8551243
• La IgE también interactúa con el receptor de baja afinidad FCER2 en los macrófagos para estimular la eliminación de parásitos y en las células B para potenciar la presentación de antígenos. Referencias relacionadas: PMID:7544003, PMID:2167225
• La IgE unida a membrana existe en isoformas larga y corta, que forman el complejo del receptor de células B (BCR). La reticulación del BCR por el antígeno controla la supervivencia y diferenciación de las células B IgE+.
• La expresión de IgE se encuentra predominantemente en los linfocitos B tras la estimulación con IL-4 y CD40, vinculándola con las respuestas inmunitarias de tipo Th2.
• El corte y empalme alternativo del gen IGHE genera una isoforma secretada y dos isoformas unidas a membrana, cada una con propiedades de señalización distintas.
• Las respuestas desreguladas de IgE contribuyen a afecciones alérgicas y anafilácticas. Referencias relacionadas: PMID:25629393, PMID:33840121, PMID:7544003

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 104-428 de la región constante de la IgE humana, cubriendo los dominios CH2-CH4. Este diseño garantiza el reconocimiento de la región Fc compartida por las isoformas secretada y unida a membrana.
• Para el Western blot (WB), considere utilizar condiciones reductoras; el peso molecular observado puede ser de aproximadamente 47 kDa, como se indica, pero la glucosilación puede desplazar la banda o producir un barrido.
• En citometría de flujo (FC), este anticuerpo es adecuado para detectar la IgE unida a membrana en células B o la IgE capturada por receptores Fc en basófilos y mastocitos; se recomiendan controles de isotipo adecuados y pasos de bloqueo de Fc.
• Para aplicaciones de ELISA, este anticuerpo monoclonal puede utilizarse como reactivo de captura o detección para la cuantificación de la IgE total; optimice la concentración de recubrimiento y combínelo con un anticuerpo de detección anti-IgE policlonal o monoclonal adecuado.
• Dado que las concentraciones de IgE en suero/plasma son bajas, la preparación de las muestras y la sensibilidad del ensayo deben verificarse con curvas estándar utilizando proteína IgE purificada.

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