IFNAR2 pAb de conejo para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P48551

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de IFNAR2

• IFNAR2 (receptor 2 del interferón alfa/beta), también conocido como IFNABR, IFNARB o IFN-alpha-REC, codifica la cadena beta del receptor del interferón de tipo I. Se generan múltiples isoformas mediante corte y empalme alternativo; cabe destacar que la isoforma 3 es una forma secretada detectada en la orina (PubMed:7759950, PubMed:8181059). El receptor se expresa en células sanguíneas y en líneas celulares linfoblastoides y de fibrosarcoma. Referencias relacionadas: PMID:7759950 PMID:8181059
• Junto con IFNAR1, IFNAR2 forma el receptor heterodimérico funcional para los interferones de tipo I (IFN-α, -β, -ε, -ω, -κ) (PubMed:10049744, PubMed:10556041, PubMed:21854986). La unión del ligando aproxima las subunidades, lo que desencadena la activación de las quinasas Janus asociadas. Referencias relacionadas: PMID:10049744 PMID:10556041 PMID:21854986
• La activación del receptor impulsa la trans fosforilación de JAK1 (unida a IFNAR2) y TYK2 (unida a IFNAR1) (PubMed:10556041, PubMed:11682488, PubMed:12105218). Posteriormente, residuos específicos de tirosina en los dominios intracelulares de IFNAR1/2 se fosforilan, creando sitios de anclaje para STAT1 y STAT2 (PubMed:11682488, PubMed:12105218, PubMed:21854986). Referencias relacionadas: PMID:10556041 PMID:11682488 PMID:12105218 PMID:21854986
• Las proteínas STAT fosforiladas se translocan al núcleo para modular la transcripción de cientos de genes estimulados por interferón (ISG), coordinando respuestas antivirales, antiproliferativas e inmunomoduladoras (PubMed:12105218, PubMed:28165510, PubMed:9121453). Referencias relacionadas: PMID:12105218 PMID:28165510 PMID:9121453
• Además de su función en la transducción de señales, IFNAR2 también puede actuar como un potente inhibidor de la actividad del receptor del interferón de tipo I, probablemente mediante la unión competitiva al ligando o la regulación de la estabilidad del receptor.
• La proteína atraviesa la membrana celular y contiene dominios extracelulares de fibronectina de tipo III; experimenta glucosilación y formación de enlaces disulfuro, como demuestran los análisis proteómicos, y está sujeta a fosforilación reguladora.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde al dominio extracelular (aa 27-243), por lo que se espera que el anticuerpo se dirija a la región de unión al ligando; es adecuado para estudios de bloqueo del receptor o para la detección de receptores solubles en biofluidos.
• En la transferencia Western, se predice una banda de aproximadamente 58 kDa; sin embargo, debido a la glucosilación ligada a N y al posible procesamiento proteolítico, pueden observarse bandas adicionales o un peso molecular aparente mayor. Validar con controles positivos (por ejemplo, células tratadas con IFN) y negativos.
• En inmunohistoquímica (IHC-P) e inmunofluorescencia (IF/ICC), se anticipa tinción de membrana. En tejidos o células que expresan la isoforma secretada, puede detectarse señal citoplasmática o de la matriz extracelular; deben probarse protocolos adecuados de fijación y permeabilización.
• Para ELISA, este anticuerpo policlonal puede utilizarse como reactivo de detección cuando se combina con un anticuerpo monoclonal de captura adecuado; la reactividad cruzada con IFNAR2 de ratón y rata debe verificarse en la matriz del ensayo.
• Al tratarse de un anticuerpo policlonal, debe monitorizarse la consistencia entre lotes y se recomiendan experimentos de titulación para nuevas aplicaciones.

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