Anticuerpo monoclonal de conejo IKKβ para IF/ICC y ELISA - O14920

Especificaciones y parámetros principales del producto

Información biológica: Función y localización de IKKβ

• IKKβ (subunidad beta de la quinasa inhibidora del factor nuclear kappa-B), también conocida como IKK2 o NFKBIKB, es una proteína quinasa de serina/treonina codificada por el gen IKBKB y es un componente central del complejo IKK canónico que activa la señalización de NF-κB (PubMed:9346484). Referencias relacionadas: PMID:9346484

• Fosforila los inhibidores de NF-κB (IκB) en dos residuos de serina críticos, desencadenando su poliubiquitinación y degradación proteasomal, lo que permite que NF-κB se trasloque al núcleo y active la transcripción génica (PubMed:20434986, PubMed:20797629, PubMed:21138416). Referencias relacionadas: PMID:20434986, PMID:20797629, PMID:21138416

• Además de IκB, IKKβ fosforila otros componentes de la vía de señalización, entre ellos NEMO/IKBKG, RELA, NFKB1, TBK1 e IKBKE, lo que actúa como un mecanismo de retroalimentación negativa para evitar la sobreproducción de mediadores inflamatorios (PubMed:11297557, PubMed:14673179, PubMed:20410276). Referencias relacionadas: PMID:11297557, PMID:14673179, PMID:20410276

• Esta quinasa también fosforila a FOXO3, mediando la inactivación dependiente de TNF de este factor de transcripción proapoptótico (PubMed:15084260), y a otros sustratos como NAA10, NCOA3, BCL10 e IRS1 (PubMed:17213322, PubMed:19716809). Referencias relacionadas: PMID:15084260, PMID:17213322, PMID:19716809

• IKKβ participa en la activación de IRF5 al fosforilar su extremo C para estimular la homodimerización y la translocación nuclear (PubMed:25326418), y en respuesta a LPS, fosforila STAT1 en Thr-749, modulando la expresión de genes inflamatorios (PubMed:32209697, PubMed:38621137). Referencias relacionadas: PMID:25326418, PMID:32209697, PMID:38621137

• A nivel subcelular, IKKβ se encuentra en el citoplasma, el núcleo y las balsas de membrana. Se expresa en altos niveles en corazón, placenta, músculo esquelético, riñón, páncreas, bazo, timo, próstata, testículos y sangre periférica.

• Las modificaciones postraduccionales incluyen acetilación, hidroxilación, fosforilación, S-nitrosilación y ubiquitinación, lo que refleja su regulación estricta.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno utilizado para generar este anticuerpo monoclonal de conejo cubre los aminoácidos 450-756, correspondientes a la región C-terminal de la IKKβ humana. Este diseño puede proporcionar un reconocimiento específico de la IKKβ de longitud completa en conformaciones desnaturalizadas o nativas.
• Para IF/ICC, se recomienda utilizar protocolos adecuados de fijación (por ejemplo, PFA al 4%) y permeabilización (por ejemplo, Tritón X-100 al 0.1%), y validar el anticuerpo en líneas celulares que expresan IKKβ como HeLa o HEK293.
• En aplicaciones de ELISA, el anticuerpo puede utilizarse para detección directa o sándwich; se recomienda optimizar la concentración del antígeno de recubrimiento y la dilución del anticuerpo.
• Dado que el anticuerpo se produce en conejo, seleccione anticuerpos secundarios compatibles para la detección y tenga en cuenta la posible reactividad cruzada con inmunoglobulinas endógenas en muestras de tejido.
• Incluya siempre controles positivos y negativos (por ejemplo, lisados de knockout de IKKβ o péptidos de bloqueo) para confirmar la especificidad.

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