mAb de conejo contra ubiquitina específica de enlace K48 - P0CG47

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la ubiquitina

• Codificada por el gen UBB, la poliubiquitina-B es una proteína precursora que se escinde para generar múltiples monómeros de ubiquitina.
• La ubiquitina existe libre o unida covalentemente a proteínas diana mediante un enlace isopéptido, funcionando como un modificador postraduccional versátil.
• Las cadenas de poliubiquitina se pueden formar a través de diferentes enlaces de lisina (por ejemplo, K6, K11, K29, K33, K48, K63) o enlaces lineales, cada uno de los cuales determina destinos celulares distintos.
• Las cadenas de poliubiquitina unidas por K48 dirigen principalmente a las proteínas a la degradación por el proteasoma 26S, una vía crítica para el control de calidad de las proteínas y la regulación del ciclo celular.
• Las cadenas unidas por K63 participan en procesos no proteolíticos como la endocitosis, las respuestas al daño del ADN y la activación del factor de transcripción NF-kappa-B.
• Su localización subcelular incluye el citoplasma, el núcleo y la membrana externa mitocondrial, lo que refleja sus diversas funciones.
• La propia ubiquitina está sujeta a modificaciones postraduccionales, como la fosforilación y la ADP-ribosilación, que pueden modular su actividad e interacciones.
• Las cadenas de poliubiquitina libres (no ancladas) también participan en la señalización celular, como la activación de proteínas quinasas, independientemente de su conjugación con otras proteínas.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético diseñado para reconocer específicamente la topología de la poliubiquitina unida por K48; se recomienda utilizar controles específicos de enlace para confirmar la especificidad del anticuerpo.
• Para la transferencia Western (WB), se recomienda la preparación de muestras en condiciones desnaturalizantes y reductoras para detectar conjugados de ubiquitina; valide el rendimiento en su sistema de muestras específico.
• En inmunofluorescencia (IF/ICC), se deben optimizar los protocolos adecuados de fijación y permeabilización para preservar las señales de ubiquitina; incluya controles negativos para evaluar el fondo.
• Para aplicaciones de ELISA, los antígenos de recubrimiento deben seleccionarse cuidadosamente para imitar el epítopo del enlace K48; confirme los límites de detección con estándares conocidos.
• La reactividad cruzada se informa solo para muestras humanas; si trabaja con otras especies, verifique la homología de secuencia y realice una validación adicional.

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